论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-38页 |
| · 微囊藻毒素的爆发 | 第12-14页 |
| · 微囊藻毒素的化学性质 | 第14-17页 |
| · 微囊藻毒素的分子结构 | 第14-15页 |
| · 微囊藻毒素的化学性质 | 第15-17页 |
| · 微囊藻毒素的毒理机制 | 第17-18页 |
| · 微囊藻毒素的分子机理 | 第17-18页 |
| · 微囊藻毒素的迁移转化 | 第18页 |
| · 微囊藻毒素的毒效应 | 第18-23页 |
| · 微囊藻毒素的肝毒性 | 第18-20页 |
| · 微囊藻毒素的肾毒性 | 第20-21页 |
| · 微囊藻毒素的生殖毒性 | 第21页 |
| · 微囊藻毒素的免疫系统毒性 | 第21-22页 |
| · 微囊藻毒素的心脏毒性 | 第22页 |
| · 微囊藻毒素的致癌机理 | 第22-23页 |
| · 微囊藻毒素的毒代动力学 | 第23-25页 |
| · 微囊藻毒素代谢的蛋白磷酸酶抑制途径 | 第23页 |
| · 微囊藻毒素代谢的损伤遗传物质 | 第23-24页 |
| · 微囊藻毒素代谢的活性氧途径 | 第24-25页 |
| · 微囊藻毒素代谢的其他途径 | 第25页 |
| · 微囊藻毒素的水生生物生态毒理学 | 第25-27页 |
| · 微囊藻毒素代谢的水生植物生态毒理学 | 第25-26页 |
| · 微囊藻毒素代谢的鱼类生态毒理学 | 第26-27页 |
| · 微囊藻毒素的毒素检测 | 第27-33页 |
| · 微囊藻毒素的生物分析法 | 第28页 |
| · 微囊藻毒素的物化分析方法 | 第28-32页 |
| · 微囊藻毒素的免疫化学法 | 第32-33页 |
| · 微囊藻毒素的去除技术 | 第33-37页 |
| · 微囊藻毒素的生物去除法 | 第33-34页 |
| · 微囊藻毒素的高级氧化技术 | 第34-35页 |
| · 微囊藻毒素的降解菌株 | 第35-36页 |
| · 微囊藻毒素的降解酶与降解机理 | 第36-37页 |
| · 本研究的目的意义 | 第37-38页 |
| 第二章 材料和方法 | 第38-51页 |
| · 实验中用到的试剂 | 第38-39页 |
| · 实验中用到的仪器 | 第39-40页 |
| · 寡核苷酸的溶解 | 第40页 |
| · 基因合成的两步法 | 第40-43页 |
| · DA-PCR | 第40-41页 |
| · OE-PCR | 第41-42页 |
| · T7 核酸内切酶 I 处理 | 第42-43页 |
| · 载体构建与测序 | 第43-47页 |
| · 质粒提取 | 第43页 |
| · 限制性内切酶消化 | 第43-44页 |
| · 重组载体的连接 | 第44页 |
| · 重组载体的热激转化 | 第44-46页 |
| · 阳性克隆的菌落 PCR 法鉴定 | 第46-47页 |
| · MLRA 的表达与活性测定 | 第47页 |
| · 外源基因的诱导表达 | 第47页 |
| · mlrA 活性测定 | 第47页 |
| · 培养条件对 MLRA 表达的影响 | 第47-48页 |
| · 蛋白胨对 MlrA 表达的影响 | 第47页 |
| · 葡萄糖对 MlrA 表达的影响 | 第47-48页 |
| · MC-LR 浓度对 MlrA 表达的影响 | 第48页 |
| · 诱导时间对 MlrA 表达的影响 | 第48页 |
| · 培养温度对 MlrA 表达的影响 | 第48页 |
| · 菌体密度对 MlrA 表达的影响 | 第48页 |
| · pH 对 MlrA 表达的影响 | 第48页 |
| · NI~(2+)柱亲和层析纯化 MLRA | 第48-50页 |
| · Ni~(2+)柱亲和层析纯化 mlrA | 第48-49页 |
| · 表达外源蛋白的 SDS-PAGE 检测 | 第49页 |
| · Folin-酚法测定蛋白 | 第49-50页 |
| · 水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第50-51页 |
| · 纯化 mlrA 对水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第50页 |
| · 冻干乳酸乳球菌对水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第50页 |
| · 构建乳酸乳球工程菌在自然水体中生长及微囊藻毒素降解实验 | 第50-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-78页 |
| · L.LACTIS 偏爱密码子编码的 MLRA 基因合成 | 第51-62页 |
| · 鞘氨醇单胞菌 ACM-3962 的 mlrA 氨基酸序列 | 第51页 |
| · 逆编码所用乳酸乳球菌密码子频率表 | 第51-53页 |
| · L.lactis 偏爱密码子编码的 mlrA 基因 | 第53页 |
| · 拟合成序列全长 | 第53页 |
| · 单链寡核苷酸的拆分 | 第53-55页 |
| · 化学合成寡核苷酸的溶解与混合 | 第55-58页 |
| · 两步法合成结果 | 第58-60页 |
| · 亚克隆载体构建与测序 | 第60-62页 |
| · MLRA 启动子的合成与功能验证 | 第62-70页 |
| · 拟合成序列全长 | 第62页 |
| · 单链寡核苷酸的拆分 | 第62-64页 |
| · 化学合成寡核苷酸的溶解与混合 | 第64-66页 |
| · 两步法合成结果 | 第66-67页 |
| · 功能验证载体构建与测序 | 第67-68页 |
| · mlr 启动子功能验证 | 第68-70页 |
| · 乳酸乳球菌表达载体构建 | 第70-72页 |
| · 乳酸乳球菌表达载体 pMG-mlr 的构建 | 第70页 |
| · 重组子的菌落 PCR 鉴定 | 第70页 |
| · 重组载体 pMG-mlr 的诱导表达 | 第70-72页 |
| · 培养条件对 MLRA 表达的影响 | 第72-75页 |
| · 蛋白胨对 mlrA 表达的影响 | 第72页 |
| · 葡萄糖对 MlrA 表达的影响 | 第72-73页 |
| · MC-LR 浓度对 MlrA 表达量的影响 | 第73页 |
| · 诱导时间对 MlrA 表达量的影响 | 第73页 |
| · 培养温度对 MlrA 表达量的影响 | 第73-74页 |
| · 菌体密度对 MlrA 表达的影响 | 第74页 |
| · pH 对 MlrA 表达的影响 | 第74页 |
| · 最适发酵工艺条件下的 mlrA 表达 | 第74-75页 |
| · NI~(2+)柱亲和层析纯化 MLRA | 第75-76页 |
| · Folin-酚法测定总蛋白质含量 | 第75页 |
| · Ni~(2+)柱亲和层析纯化 mlrA | 第75-76页 |
| · 水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第76-78页 |
| · 纯化 mlrA 对水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第76页 |
| · 冻干乳酸乳球菌对水环境中的微囊藻毒素降解实验 | 第76-77页 |
| · 构建乳酸乳球工程菌在自然水体中生长及微囊藻毒素降解实验 | 第77-78页 |
| 第四章 结论 | 第78-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
