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大豆组织特异型启动子表达特性分析

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大豆组织特异型启动子表达特性分析
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-8页
缩略词表第8-9页
1 引言第9-20页
  1.1 研究背景第9-10页
  1.2 植物启动子概述第10-12页
    1.2.1 组成型启动子第10-11页
    1.2.2 诱导型启动子第11页
    1.2.3 组织特异型启动子第11-12页
  1.3 组织特异型启动子研究进展第12-17页
    1.3.1 植物启动子特异表达相关元件第12-14页
    1.3.2 根特异表达启动子第14页
    1.3.3 叶特异表达启动子第14-16页
    1.3.4 花特异表达启动子第16页
    1.3.5 种子特异表达启动子第16-17页
  1.4 启动子研究的方法第17-18页
    1.4.1 启动子的分离克隆方法第17-18页
    1.4.2 启动子的生物信息学分析第18页
    1.4.3 启动子表达模式的验证第18页
  1.5 发根农杆菌介导的大豆遗传转化第18-19页
  1.6 研究目的及意义第19-20页
2 材料与方法第20-41页
  2.1 实验材料第20-22页
    2.1.1 植物材料第20页
    2.1.2 载体和菌株第20页
    2.1.3 实验试剂及培养基第20-22页
  2.2 实验方法第22-41页
    2.2.1 大豆基因组DNA的提取第22-23页
    2.2.2 大豆组织特异表达基因的筛选第23-24页
    2.2.3 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式第24-27页
    2.2.4 组织特异启动子的克隆第27-28页
    2.2.5 启动子GUS表达载体的构建第28-34页
    2.2.6 农杆菌侵染法转化拟南芥第34-35页
    2.2.7 拟南芥培养及转基因植株筛选第35-36页
    2.2.8 阳性植株的组织化学分析第36-37页
    2.2.9 GUS表达量RT-PCR检测第37-38页
    2.2.10 发根农杆菌介导的大豆遗传转化第38-40页
    2.2.11 大豆毛状根的组织化学染色第40-41页
3 结果与分析第41-63页
  3.1 大豆组织特异表达基因的筛选第41-42页
  3.2 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式第42页
  3.3 组织特异启动子的克隆与载体构建第42-46页
    3.3.1 组织特异启动子的克隆第42-43页
    3.3.2 启动子GUS表达载体的构建第43-46页
  3.4 拟南芥转基因阳性植株的筛选第46-48页
    3.4.1 Basta筛选抗性植株第46-47页
    3.4.2 转基因阳性植株Bar试纸条检验第47页
    3.4.3 转基因T1代植株目的基因的检测第47页
    3.4.4 已获得的转基因阳性植株第47-48页
  3.5 拟南芥阳性植株组织化学分析(GUS染色)第48-53页
    3.5.1 叶特异启动子GUS染色结果第48-49页
    3.5.2 根特异启动子GUS染色结果第49-52页
    3.5.3 组成型启动子及野生型拟南芥GUS染色结果第52-53页
  3.6 拟南芥阳性植株GUS表达情况检测第53-54页
    3.6.1 拟南芥各组织RNA提取结果第53页
    3.6.2 叶特异启动子GUS表达情况检测第53页
    3.6.3 根特异启动子GUS表达情况检测第53-54页
    3.6.4 组成型启动子GUS表达情况检测第54页
  3.7 发根农杆菌侵染大豆及GUS染色鉴定第54-60页
    3.7.1 大豆毛状根的获得第54-56页
    3.7.2 发根诱导率及发根数第56页
    3.7.3 组织特异启动子GUS染色结果第56-60页
    3.7.4 GUS基因转化效率第60页
  3.8 组织特异启动子的生物信息学分析第60-63页
4 讨论第63-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-72页
致谢第72页

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