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大豆组织特异型启动子表达特性分析
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大豆组织特异型启动子表达特性分析
论文目录
摘要
第1-5页
Abstract
第5-8页
缩略词表
第8-9页
1 引言
第9-20页
1.1 研究背景
第9-10页
1.2 植物启动子概述
第10-12页
1.2.1 组成型启动子
第10-11页
1.2.2 诱导型启动子
第11页
1.2.3 组织特异型启动子
第11-12页
1.3 组织特异型启动子研究进展
第12-17页
1.3.1 植物启动子特异表达相关元件
第12-14页
1.3.2 根特异表达启动子
第14页
1.3.3 叶特异表达启动子
第14-16页
1.3.4 花特异表达启动子
第16页
1.3.5 种子特异表达启动子
第16-17页
1.4 启动子研究的方法
第17-18页
1.4.1 启动子的分离克隆方法
第17-18页
1.4.2 启动子的生物信息学分析
第18页
1.4.3 启动子表达模式的验证
第18页
1.5 发根农杆菌介导的大豆遗传转化
第18-19页
1.6 研究目的及意义
第19-20页
2 材料与方法
第20-41页
2.1 实验材料
第20-22页
2.1.1 植物材料
第20页
2.1.2 载体和菌株
第20页
2.1.3 实验试剂及培养基
第20-22页
2.2 实验方法
第22-41页
2.2.1 大豆基因组DNA的提取
第22-23页
2.2.2 大豆组织特异表达基因的筛选
第23-24页
2.2.3 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式
第24-27页
2.2.4 组织特异启动子的克隆
第27-28页
2.2.5 启动子GUS表达载体的构建
第28-34页
2.2.6 农杆菌侵染法转化拟南芥
第34-35页
2.2.7 拟南芥培养及转基因植株筛选
第35-36页
2.2.8 阳性植株的组织化学分析
第36-37页
2.2.9 GUS表达量RT-PCR检测
第37-38页
2.2.10 发根农杆菌介导的大豆遗传转化
第38-40页
2.2.11 大豆毛状根的组织化学染色
第40-41页
3 结果与分析
第41-63页
3.1 大豆组织特异表达基因的筛选
第41-42页
3.2 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式
第42页
3.3 组织特异启动子的克隆与载体构建
第42-46页
3.3.1 组织特异启动子的克隆
第42-43页
3.3.2 启动子GUS表达载体的构建
第43-46页
3.4 拟南芥转基因阳性植株的筛选
第46-48页
3.4.1 Basta筛选抗性植株
第46-47页
3.4.2 转基因阳性植株Bar试纸条检验
第47页
3.4.3 转基因T1代植株目的基因的检测
第47页
3.4.4 已获得的转基因阳性植株
第47-48页
3.5 拟南芥阳性植株组织化学分析(GUS染色)
第48-53页
3.5.1 叶特异启动子GUS染色结果
第48-49页
3.5.2 根特异启动子GUS染色结果
第49-52页
3.5.3 组成型启动子及野生型拟南芥GUS染色结果
第52-53页
3.6 拟南芥阳性植株GUS表达情况检测
第53-54页
3.6.1 拟南芥各组织RNA提取结果
第53页
3.6.2 叶特异启动子GUS表达情况检测
第53页
3.6.3 根特异启动子GUS表达情况检测
第53-54页
3.6.4 组成型启动子GUS表达情况检测
第54页
3.7 发根农杆菌侵染大豆及GUS染色鉴定
第54-60页
3.7.1 大豆毛状根的获得
第54-56页
3.7.2 发根诱导率及发根数
第56页
3.7.3 组织特异启动子GUS染色结果
第56-60页
3.7.4 GUS基因转化效率
第60页
3.8 组织特异启动子的生物信息学分析
第60-63页
4 讨论
第63-66页
5 结论
第66-67页
参考文献
第67-72页
致谢
第72页
本篇论文共
72
页,
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