论文目录 | |
摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-11页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
1.1 口蹄疫病毒 | 第11-13页 |
1.2 天然免疫 | 第13-16页 |
1.3 FMDV与天然免疫的关系 | 第16-17页 |
1.4 PCBP2蛋白 | 第17-19页 |
1.4.1 PCBP2的结构特点 | 第17-18页 |
1.4.2 PCBP2的功能 | 第18页 |
1.4.3 PCBP2与病毒的关系 | 第18-19页 |
1.5 本研究意义与思路 | 第19-20页 |
第二章 PCBP2与FMDV蛋白的互作试验 | 第20-31页 |
2.1 材料 | 第20-23页 |
2.1.1 质粒、抗体以及细胞系 | 第20页 |
2.1.2 试剂及其配制 | 第20-23页 |
2.1.3 主要器材 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-27页 |
2.2.1 细胞转化 | 第23页 |
2.2.2 质粒提取 | 第23-24页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第24页 |
2.2.4 细胞转染 | 第24-25页 |
2.2.5 细胞冻存 | 第25页 |
2.2.6 免疫共沉淀 | 第25页 |
2.2.7 Western blot | 第25-26页 |
2.2.8 GST-PCBP2蛋白的表达与纯化 | 第26-27页 |
2.2.9 GST pull-down检测 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-29页 |
2.3.1 免疫共沉淀法检测与PCBP2发生相互作用的FMDV蛋白 | 第27-28页 |
2.3.2 GST pull-down鉴定与PCBP2互作的FMDV蛋白 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 PCBP2和FMDV的互作蛋白与IFN-β信号通路的关系 | 第31-36页 |
3.1 材料 | 第31页 |
3.1.1 质粒、抗体、细胞系和毒株 | 第31页 |
3.1.2 试剂 | 第31页 |
3.1.3 主要器材 | 第31页 |
3.2 方法 | 第31-32页 |
3.2.1 检测PCBP2对VISA介导的IFN-β的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 检测FMDV和PCBP2与VISA介导的IFN-β的关系 | 第32页 |
3.2.3 其他方法 | 第32页 |
3.2.4 数据分析 | 第32页 |
3.3 结果 | 第32-35页 |
3.3.1 PCBP2对VISA介导的IFN-β的负调控作用 | 第32-34页 |
3.3.2 FMDV与PCBP2对VISA介导的IFN-β的负调控作用 | 第34-35页 |
3.4 讨论 | 第35-36页 |
第四章 PCBP2促进FMDV复制的分子机制研究 | 第36-45页 |
4.1 材料 | 第36页 |
4.1.1 质粒、抗体、病毒和细胞系 | 第36页 |
4.1.2 试剂 | 第36页 |
4.1.3 主要器材 | 第36页 |
4.2 方法 | 第36-39页 |
4.2.1 检测FMDV蛋白与PCBP2介导的外源VISA的关系 | 第36-37页 |
4.2.2 检测FMDV蛋白对PCBP2介导的内源VISA的关系 | 第37页 |
4.2.3 检测FMDV蛋白VP0和PCBP2降解VISA的途径 | 第37页 |
4.2.4 检测FMDV蛋白VP0对PCBP2与VISA相互作用的影响 | 第37页 |
4.2.5 检测FMDV蛋白VP0对PCBP2与AIP4相互作用的关系 | 第37-38页 |
4.2.6 鉴定VISA敲除对FMDV复制的影响 | 第38页 |
4.2.7 MEF细胞RNA的反转录 | 第38页 |
4.2.8 实时荧光定量PCR检测 | 第38-39页 |
4.2.9 数据分析 | 第39页 |
4.3 结果 | 第39-43页 |
4.3.1 VP0、3D降解PCBP2介导的外源VISA | 第39页 |
4.3.2 FMDV蛋白VP0特异性降解PCBP2介导的内源VISA | 第39-41页 |
4.3.3 FMDV蛋白VP0和PCBP2通过凋亡途径降解VISA | 第41-42页 |
4.3.4 FMDV蛋白VP0对PCBP2-VISA复合物的作用 | 第42页 |
4.3.5 FMDV蛋白VP0对PCBP2-AIP4复合物的作用 | 第42页 |
4.3.6 VISA敲除促进FMDV的复制 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-45页 |
全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
导师简介 | 第53-54页 |