论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 前言 | 第13页 |
| 2 分子标记 | 第13-16页 |
| 2.1 随机扩增多态性DNA | 第14页 |
| 2.2 限制性片段长度多态性 | 第14-15页 |
| 2.3 简单重复序列标记 | 第15页 |
| 2.4 单链构象多态性 | 第15页 |
| 2.5 单核苷酸多态性 | 第15-16页 |
| 3 BMPR-IB基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 4 GDF9基因的研究进展 | 第17-19页 |
| 5 实时荧光定量PCR技术 | 第19-22页 |
| 5.1 实时荧光定量PCR技术的原理 | 第20页 |
| 5.2 实时荧光定量PCR技术的优缺点 | 第20-21页 |
| 5.3 实时荧光定量PCR技术的方法 | 第21-22页 |
| 6 研究绵羊品种特征简介 | 第22-23页 |
| 6.1 甘肃高山细毛羊 | 第22页 |
| 6.2 蒙古羊 | 第22-23页 |
| 6.3 小尾寒羊 | 第23页 |
| 6.4 无角陶赛特羊 | 第23页 |
| 7 试验的研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 绵羊BMPR-IB基因CDS区597、746、1113位点的多态性与产羔数的相关性分析 | 第25-54页 |
| 1 试验材料 | 第25-26页 |
| 1.1 试验动物 | 第25页 |
| 1.2 主要的试验仪器和设备 | 第25页 |
| 1.3 试验试剂 | 第25-26页 |
| 1.3.1 常规试剂 | 第25页 |
| 1.3.2 分子生物学试剂 | 第25-26页 |
| 1.4 试验溶液的配置 | 第26页 |
| 2 试验方法 | 第26-30页 |
| 2.1 试验动物血液采集 | 第26页 |
| 2.2 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.3 基因组DNA的检测 | 第27页 |
| 2.3.1 紫外线分光光度检测 | 第27页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第27页 |
| 2.4 BMPR-IB基因引物的设计 | 第27-28页 |
| 2.5 PCR反应体系及反应程序 | 第28页 |
| 2.5.1 PCR反应体系 | 第28页 |
| 2.5.2 PCR反应程序 | 第28页 |
| 2.6 PCR扩增产物的检测 | 第28页 |
| 2.7 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第28-30页 |
| 2.7.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第28-29页 |
| 2.7.2 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.7.3 聚丙烯酰胺凝胶的银染 | 第29-30页 |
| 2.8 图像分析 | 第30页 |
| 2.9 PCR产物回收及测序 | 第30页 |
| 3 数据分析及软件使用 | 第30-32页 |
| 3.1 基因频率和基因型频率 | 第30-31页 |
| 3.2 杂合度 | 第31页 |
| 3.3 有效等位基因数 | 第31页 |
| 3.4 多态性系含量 | 第31页 |
| 3.5 Hardy-Weinberg平衡状态检验 | 第31-32页 |
| 4 实验结果与分析 | 第32-51页 |
| 4.1 基因组DNA提取的结果 | 第32页 |
| 4.2 目的产物PCR扩增的结果 | 第32-34页 |
| 4.2.1 BMPR-IB基因CDS区597位点扩增的结果 | 第32-33页 |
| 4.2.2 BMPR-IB基因CDS区746位点扩增的结果 | 第33-34页 |
| 4.2.3 BMPR-IB基因CDS区1113位点扩增的结果 | 第34页 |
| 4.3 PCR-SSCP实验结果 | 第34-36页 |
| 4.3.1 BMPR-IB基因CDS区597位点PCR-SSCP实验结果 | 第34-35页 |
| 4.3.2 BMPR-IB基因CDS区746位点PCR-SSCP实验结果 | 第35页 |
| 4.3.2 BMPR-IB基因CDS区1113位点PCR-SSCP实验结果 | 第35-36页 |
| 4.4 不同基因型产物的测序结果 | 第36-39页 |
| 4.4.1 BMPR-IB基因CDS区597位点测序结果 | 第36-37页 |
| 4.4.2 BMPR-IB基因CDS区746位点测序结果 | 第37-38页 |
| 4.4.3 BMPR-IB基因CDS区1113位点测序结果 | 第38-39页 |
| 4.5 不同绵羊品种的基因频率和基因型频率 | 第39-45页 |
| 4.5.1 BMPR-IB基因CDS区597位点的基因频率和基因型频率 | 第39-41页 |
| 4.5.2 BMPR-IB基因CDS区746位点的基因频率和基因型频率 | 第41-43页 |
| 4.5.3 BMPR-IB基因CDS区1113位点的基因频率和基因型频率 | 第43-45页 |
| 4.6 不同产羔类型绵羊间基因型分布差异分析 | 第45-48页 |
| 4.6.1 BMPR-IB基因CDS区597位点的基因型分布差异分析 | 第45-46页 |
| 4.6.2 BMPR-IB基因CDS区746位点的基因型分布差异分析 | 第46-47页 |
| 4.6.3 BMPR-IB基因CDS区1113位点的基因型分布差异分析 | 第47-48页 |
| 4.7 多态性与产羔性状的相关性分析 | 第48-51页 |
| 4.7.1 BMPR-IB基因CDS区597位点的互作效应 | 第48-49页 |
| 4.7.2 BMPR-IB基因CDS区746位点的互作效应 | 第49-50页 |
| 4.7.3 BMPR-IB基因CDS区1113位点的互作效应 | 第50-51页 |
| 5 讨论 | 第51-53页 |
| 5.1 遗传学分析 | 第51-52页 |
| 5.2 基因型与产羔性能的分析 | 第52-53页 |
| 6 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 绵羊GDF9基因第一外显子多态性与产羔数的相关性分析 | 第54-63页 |
| 1 试验材料 | 第54页 |
| 2 试验方法 | 第54-56页 |
| 2.1 试验动物血液采集 | 第54页 |
| 2.2 基因组DNA提取 | 第54页 |
| 2.3 基因组DNA的检测 | 第54页 |
| 2.4 GDF9基因引物的设计 | 第54-55页 |
| 2.5 PCR反应体系及反应程序 | 第55页 |
| 2.5.1 PCR反应体系 | 第55页 |
| 2.5.2 PCR反应程序 | 第55页 |
| 2.6 PCR扩增产物的检测 | 第55页 |
| 2.7 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第55-56页 |
| 2.7.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第55页 |
| 2.7.2 PCR扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55页 |
| 2.7.3 聚丙烯酰胺凝胶的银染 | 第55-56页 |
| 2.8 图像分析 | 第56页 |
| 2.9 PCR产物回收及测序 | 第56页 |
| 3 数据分析及软件使用 | 第56页 |
| 4 实验结果与分析 | 第56-61页 |
| 4.1 基因组DNA提取的结果 | 第56页 |
| 4.2 目的产物PCR扩增的结果 | 第56-57页 |
| 4.3 PCR-SSCP实验结果 | 第57页 |
| 4.4 不同基因型产物的测序结果 | 第57-58页 |
| 4.5 不同绵羊品种的基因频率和基因型频率 | 第58-59页 |
| 4.6 不同产羔类型绵羊间基因型分布差异分析 | 第59-60页 |
| 4.7 多态性与产羔性状的相关性分析 | 第60-61页 |
| 5 讨论 | 第61-62页 |
| 6 小结 | 第62-63页 |
| 第四章 GDF9基因在不同繁殖力绵羊各组织中的表达差异及分析 | 第63-70页 |
| 1 试验材料 | 第63页 |
| 1.1 试验动物 | 第63页 |
| 1.2 主要的试验仪器和设备 | 第63页 |
| 1.3 试验试剂 | 第63页 |
| 2 试验方法 | 第63-65页 |
| 2.1 试验动物各组织样的采集 | 第63页 |
| 2.2 总RNA的提取 | 第63页 |
| 2.3 RNA的检测 | 第63-64页 |
| 2.4 反转录 | 第64页 |
| 2.5 引物设计 | 第64页 |
| 2.6 PCR反应体系及反应程序 | 第64页 |
| 2.6.1 PCR反应体系 | 第64页 |
| 2.6.2 PCR反应程序 | 第64页 |
| 2.7 PCR扩增产物的检测 | 第64-65页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR | 第65页 |
| 3 数据分析及软件使用 | 第65页 |
| 4 实验结果与分析 | 第65-68页 |
| 4.1 基因组RNA提取的结果 | 第65-66页 |
| 4.2 目的产物PCR扩增的结果 | 第66页 |
| 4.3 溶解曲线分析 | 第66-67页 |
| 4.4 不同组织中的表达量 | 第67-68页 |
| 5 讨论 | 第68-69页 |
| 6 小结 | 第69-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 附表1：试验中用到的主要仪器和设备 | 第77-78页 |
| 附录1：基因组DNA提取 | 第78-79页 |
| 附录2：紫外线分光光度检测 | 第79-80页 |
| 附录3：RNA提取的步骤 | 第80-81页 |
| 附录4：反转录步骤 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简介 | 第83-84页 |
| 导师简介 | 第84-85页 |
