论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| SUMMARY | 第7-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 植物转录因子的研究 | 第11页 |
| 1.2 植物ERFs转录因子 | 第11-16页 |
| 1.2.1 ERFs转录因子的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.2 ERFs转录因子结构特征 | 第12-14页 |
| 1.2.3 ERFs转录因子在生物胁迫中的作用 | 第14-15页 |
| 1.2.4 ERFs转录因子在非生物逆境胁迫中的作用 | 第15-16页 |
| 1.3 马铃薯ERF转录因子研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 酵母双杂交技术的基本原理 | 第17-21页 |
| 1.4.1 酵母双杂交技术的优点和局限 | 第18-19页 |
| 1.4.2 酵母双杂交系统的应用 | 第19-21页 |
| 1.5 酵母双杂交技术的衍生 | 第21-23页 |
| 1.5.1 酵母单杂交 | 第21页 |
| 1.5.2 酵母三杂交 | 第21-22页 |
| 1.5.3 反向酵母双杂交技术 | 第22页 |
| 1.5.4 细菌双杂交技术 | 第22-23页 |
| 1.5.5 膜定位和分泌途径双杂交系统 | 第23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 马铃薯转录因子 StERF5 基因克隆及其序列分析 | 第24-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 工具酶和试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 常用抗生素与激素的配置 | 第25页 |
| 2.1.5 培养基的配置 | 第25页 |
| 2.1.6 模板与引物 | 第25页 |
| 2.1.7 仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.2 StERF5转录因子基因的扩增 | 第27-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 马铃薯总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 StERF5基因cDNA的克隆 | 第29-30页 |
| 2.3.3 克隆载体构建与检测 | 第30页 |
| 2.3.4 马铃薯StERF5基因氨基酸序列比对 | 第30-32页 |
| 2.3.5 StERF5基因的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 马铃薯酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-StERF5的构建及鉴定 | 第36-50页 |
| 3.1 试验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌株、载体和文库 | 第36页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-43页 |
| 3.2.1 诱饵载体pGBKT7-StERF5的构建 | 第37-41页 |
| 3.2.2 诱饵载体pGBKT7-StERF5毒性检测 | 第41-43页 |
| 3.2.3 诱饵载体pGBKT7-StERF5自激活检测 | 第43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 诱饵载体pGBKT7-StERF5的构建及检测 | 第43-46页 |
| 3.3.2 诱饵载体pGBKT7-StERF5的毒性检测 | 第46-47页 |
| 3.3.3 诱饵载体pGBKT7-StERF5的自激活检测 | 第47-49页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 酵母双杂交文库的筛选及阳性克隆的鉴定 | 第50-66页 |
| 4.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 菌株及质粒载体 | 第50页 |
| 4.1.2 试验药品 | 第50页 |
| 4.1.3 检测引物设计 | 第50页 |
| 4.1.4 试验仪器 | 第50-51页 |
| 4.2 试验方法 | 第51-58页 |
| 4.2.1 酵母双杂交对照实验 | 第51-52页 |
| 4.2.2 诱饵质粒与文库质粒共转化筛选(PEG/LiAc法) | 第52-54页 |
| 4.2.3 诱饵菌株与文库菌液杂交筛选(Mating法) | 第54-55页 |
| 4.2.4 候选蛋白阳性克隆的鉴定 | 第55-57页 |
| 4.2.5 转化大肠杆菌感受态细胞进行扩增 | 第57页 |
| 4.2.6 大肠杆菌菌液PCR | 第57页 |
| 4.2.7 阳性克隆测序及序列分析 | 第57页 |
| 4.2.8 酵母回转验证阳性克隆 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-65页 |
| 4.3.1 酵母双杂交对照实验 | 第58-59页 |
| 4.3.2 cDNA文库的筛选 | 第59-60页 |
| 4.3.3 候选蛋白阳性克隆的鉴定 | 第60-61页 |
| 4.3.4 cDNA测序及GO分析 | 第61-63页 |
| 4.3.5 候选基因组蛋白H2B的酵母回转验证 | 第63-65页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第65-66页 |
| 第五章 结论与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 作者简介 | 第86-87页 |
| 导师简介 | 第87-88页 |
