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基于恒温核酸扩增的沙门氏菌检测方法的研究
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基于恒温核酸扩增的沙门氏菌检测方法的研究
论文目录
摘要
第1-5页
abstract
第5-10页
第一章 文献综述
第10-32页
1.1 沙门氏菌简介
第10页
1.2 沙门氏菌检测方法
第10-29页
1.2.1 培养法
第11-12页
1.2.2 免疫学法
第12-13页
1.2.3 核酸杂交法
第13-14页
1.2.4 变温核酸扩增方法
第14-16页
1.2.5 等温核酸扩增方法
第16-27页
1.2.5.1 环介导等温扩增
第16-18页
1.2.5.2 依赖于解旋酶的等温核酸扩增
第18-19页
1.2.5.3 交叉引物等温扩增技术
第19-20页
1.2.5.4 重组酶聚合扩增
第20-21页
1.2.5.5 滚环扩增
第21-22页
1.2.5.6 指数等温扩增
第22-24页
1.2.5.7 单引物引发的核酸扩增
第24-25页
1.2.5.8 基于变性泡介导的链交换扩增
第25-27页
1.2.6 传统沙门氏菌RNA检测方法
第27-29页
1.2.6.1 反转录聚合酶链式扩增
第27-28页
1.2.6.2 依赖核酸序列的扩增
第28-29页
1.2.6.3 反转录环介导等温核酸扩增
第29页
1.3 不同表征方法在沙门氏菌核酸检测中的应用
第29-30页
1.4 本论文的研究意义与主要内容
第30-32页
第二章 等温核酸扩增反应对沙门氏菌检测的研究
第32-54页
2.1 引言
第32-34页
2.2 实验部分
第34-41页
2.2.1 仪器与试剂
第34-35页
2.2.2 沙门氏菌培养基的配制及增菌培养
第35页
2.2.3 沙门氏菌基因组DNA的提取
第35-36页
2.2.4 琼脂糖凝胶电泳
第36-37页
2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳的原理
第36-37页
2.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳的制备
第37页
2.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第37-39页
2.2.5.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
第37-38页
2.2.5.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备
第38-39页
2.2.5.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测产物
第39页
2.2.6 实时荧光检测体系
第39-41页
2.2.6.1 环介导等温扩增反应体系
第39-40页
2.2.6.2 基于变性泡介导的链交换扩增反应体系
第40-41页
2.3 结果讨论
第41-52页
2.3.1 沙门氏菌基因组DNA电泳表征
第41-43页
2.3.2 环介导等温核酸扩增反应对沙门氏菌检测的研究
第43-48页
2.3.2.1 环介导等温核酸扩增反应实验原理
第43页
2.3.2.2 LAMP反应扩增温度的研究
第43-44页
2.3.2.3 LAMP反应体系的优化
第44-46页
2.3.2.4 灵敏度的检测
第46-47页
2.3.2.5 对提高LAMP反应速率的探究
第47-48页
2.3.3 变性泡介导的链交换扩增对沙门氏菌检测的研究
第48-52页
2.3.3.1 实验机理验证
第49页
2.3.3.2 SEA方法对沙门氏菌的特异性检测
第49-50页
2.3.3.3 SEA方法对沙门氏菌的灵敏度检测
第50-51页
2.3.3.4 抗干扰检测
第51-52页
2.4 小结
第52-54页
第三章 基于内切酶和聚合酶联用的链交换扩增核酸检测方法的建立
第54-78页
3.1 引言
第54-56页
3.2 实验部分
第56-60页
3.2.1 仪器与试剂
第56-58页
3.2.2 RNA的提取与浓度估计
第58-59页
3.2.3 模拟样本的处理
第59页
3.2.4 高等链交换扩增(ASEA)反应体系
第59-60页
3.2.4.1 实时荧光检测体系
第59页
3.2.4.2 肉眼可视化比色检测体系
第59-60页
3.3 实验方案设计
第60-63页
3.3.1 实验原理
第60-62页
3.3.2 核酸链的设计
第62-63页
3.4 结果与讨论
第63-76页
3.4.1 实验机理验证
第63-64页
3.4.2 SEA-EXPAR扩增方法的构建
第64-65页
3.4.3 ASEA与SEA-EXPAR方法的比较
第65-66页
3.4.4 不同浓度寨卡病毒RNA的检测
第66-67页
3.4.5 DNA聚合酶的浓度优化
第67-68页
3.4.6 限制性核酸内切酶的浓度优化
第68-69页
3.4.7 ASEA方法灵敏度验证
第69-71页
3.4.8 ASEA方法特异性检测
第71-73页
3.4.9 ASEA方法抗干扰能力检测
第73-74页
3.4.10 沙门氏菌RNA灵敏度验证
第74-75页
3.4.11 沙门氏菌模拟实际样本的检测
第75-76页
3.5 本章小结
第76-78页
第四章 展望
第78-81页
结论
第81-83页
参考文献
第83-90页
附录:论文中使用的缩略词
第90-91页
致谢
第91-92页
攻读硕士学位期间发表的论文目录
第92-93页
本篇论文共
93
页,
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