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南极真菌产褐藻胶裂解酶Aly-i7的基因克隆、表达和酶学性质研究

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南极真菌产褐藻胶裂解酶Aly-i7的基因克隆、表达和酶学性质研究
论文目录
 
摘要第1-5页
abstract第5-10页
第1章 绪论第10-28页
  1.1 褐藻胶第10-12页
    1.1.1 褐藻胶简介第10-11页
    1.1.2 褐藻胶的应用第11-12页
  1.2 褐藻寡糖第12-19页
    1.2.1 褐藻寡糖简介第12页
    1.2.2 褐藻寡糖的制备方法第12-14页
    1.2.3 褐藻寡糖的生物活性第14-18页
    1.2.4 褐藻寡糖的纯化第18-19页
  1.3 褐藻胶裂解酶第19-26页
    1.3.1 褐藻胶裂解酶简介第19-20页
    1.3.2 褐藻胶裂解酶的来源第20-23页
    1.3.3 褐藻胶裂解酶的分类第23-24页
    1.3.4 褐藻胶裂解酶的活性测定方法第24-25页
    1.3.5 褐藻胶裂解酶的应用第25-26页
  1.4 本研究的意义第26-28页
第2章 南极真菌产褐藻胶裂解酶菌株的筛选与鉴定第28-37页
  2.1 材料与方法第28-32页
    2.1.1 材料来源第28页
    2.1.2 主要试剂及配制第28-29页
    2.1.3 培养基及成分第29页
    2.1.4 实验仪器第29页
    2.1.5 产褐藻胶裂解酶菌株的筛选第29-30页
    2.1.6 褐藻胶裂解酶活力测定第30-32页
    2.1.7 褐藻胶裂解酶活性菌株的种属鉴定第32页
  2.2 实验结果第32-36页
    2.2.1 初筛及复筛结果第32-33页
    2.2.2 DNS法测定褐藻胶酶活结果第33-34页
    2.2.3 褐藻胶裂解酶菌株的种属鉴定结果第34-36页
  2.3 讨论第36页
  2.4 小结第36-37页
第3章 南极真菌褐藻胶裂解酶基因的克隆及表达第37-50页
  3.1 材料与方法第37-42页
    3.1.1 材料第37-38页
    3.1.2 试验用缓冲液配制第38页
    3.1.3 培养基第38-39页
    3.1.4 SDS-PAGE电泳第39页
    3.1.5 工程菌的构建第39-41页
    3.1.6 重组蛋白的诱导表达及纯化第41-42页
    3.1.7 诱导表达条件的优化第42页
  3.2 实验结果第42-48页
    3.2.1 褐藻胶裂解酶基因Aly-i7的序列分析第42-45页
    3.2.2 南极真菌藻胶裂解酶基因Aly-i7的克隆第45页
    3.2.3 重组质粒的双酶切鉴定第45页
    3.2.4 重组酶的诱导表达与蛋白纯化第45-47页
    3.2.5 重组酶的诱导表达条件优化第47-48页
  3.3 讨论第48页
  3.4 小结第48-50页
第4章 重组褐藻胶裂解酶的酶学性质研究第50-59页
  4.1 实验材料第50-51页
    4.1.1 出发菌株与培养基第50页
    4.1.2 实验试剂及配制第50-51页
    4.1.3 实验设备第51页
  4.2 实验方法第51-53页
    4.2.1 底物选择性第51页
    4.2.2 温度对褐藻胶裂解酶Aly-i7的影响第51页
    4.2.3 pH对褐藻胶裂解酶Aly-i7的影响第51-52页
    4.2.4 不同金属离子对Aly-i7的酶活力影响第52页
    4.2.5 Aly-i7的酶解产物分析第52-53页
  4.3 实验结果与分析第53-57页
    4.3.1 Aly-i7的底物选择性第53页
    4.3.2 Aly-i7最适反应温度第53-54页
    4.3.3 Aly-i7的热稳定性第54页
    4.3.4 Aly-i7最适pH第54-55页
    4.3.5 Aly-i7的pH稳定性第55-56页
    4.3.6 金属离子对Aly-i7的酶活力影响第56页
    4.3.7 Aly-i7的产物分析第56-57页
  4.4 讨论第57-58页
  4.5 小结第58-59页
第5章 褐藻寡糖对黄瓜白粉病的防治效果研究第59-66页
  5.1 实验材料第59-60页
    5.1.1 菌种与培养基第59页
    5.1.2 主要试剂和材料第59-60页
    5.1.3 主要仪器第60页
  5.2 实验方法第60-62页
    5.2.1 褐藻寡糖的制备及药剂配制第60-61页
    5.2.2 褐藻寡糖对黄瓜白粉病菌的毒力测定第61-62页
    5.2.3 褐藻寡糖防治黄瓜白粉病的盆栽实验第62页
  5.3 结果与分析第62-64页
    5.3.1 褐藻寡糖的室内毒力测定结果第62-63页
    5.3.2 5%褐藻寡糖对黄瓜白粉病的盆栽防效实验第63-64页
  5.4 讨论第64-65页
  5.5 小结第65-66页
第6章 总结与展望第66-68页
  6.1 总结第66-67页
  6.2 展望第67-68页
参考文献第68-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表的学术论文第77-78页

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