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寨卡病毒NS2B-NS3蛋白酶复合物的原核表达及活性研究

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寨卡病毒NS2B-NS3蛋白酶复合物的原核表达及活性研究
论文目录
 
摘要第1-4页
Abstract第4-8页
引言第8-12页
第一部分 寨卡病毒NS2B_H-NS3pro蛋白酶复合物的原核表达及纯化第12-32页
  1.1 材料第12-17页
    1.1.1 菌株第12页
    1.1.2 主要试剂第12页
    1.1.3 主要需配制的试剂第12-17页
    1.1.4 主要仪器设备第17页
  1.2 方法第17-25页
    1.2.1 目的基因的合成第17-21页
    1.2.2 pET-28b-NS2B_H-G4TG4-NS3pro原核表达载体构建第21页
    1.2.3 工程菌制备及转化产物鉴定第21-23页
    1.2.4 重组质粒提取第23页
    1.2.5 重组质粒序列分析第23页
    1.2.6 IPTG诱导重组质粒表达第23-24页
    1.2.7 表达产物SDS-PAGE分析第24页
    1.2.8 重组蛋白的纯化第24页
    1.2.9 BCA测定纯化蛋白浓度第24-25页
    1.2.10 纯化蛋白的透析除盐第25页
  1.3 结果第25-30页
    1.3.1 重叠PCR扩增产物的电泳第25-27页
    1.3.2 菌落PCR扩增产物电泳第27页
    1.3.3 重组序列的测序第27-28页
    1.3.4 表达产物的SDS-PAGE分析第28-29页
    1.3.5 纯化蛋白的SDS-PAGE分析第29页
    1.3.6 BCA测定纯化蛋白浓度第29-30页
  1.4 讨论第30-32页
第二部分 寨卡病毒NS2B_H-NS3pro蛋白酶复合物的质谱鉴定及酶活性分析第32-38页
  1.1 材料第32-33页
    1.1.1 主要试剂第32页
    1.1.2 主要仪器及软件第32页
    1.1.3 主要需配制的试剂第32-33页
  1.2 方法第33-34页
    1.2.1 MALDI-TOF MS技术鉴定重组蛋白第33页
    1.2.2 重组蛋白酶活性检测第33-34页
  1.3 结果第34-36页
    1.3.1 MALDI-TOF MS鉴定结果第34-35页
    1.3.2 重组蛋白FRET检测结果第35-36页
  1.4 讨论第36-38页
结语第38-39页
参考文献第39-43页
附录第43-55页
附录1: NS2B_H-G4TG4-NS3pro测序图第43-45页
附录2: 英文索位语第45-46页
附录3: 综述第46-55页
参考文献第51-55页
在校期间发表论文情况第55-56页
致谢第56-57页
统计学审核证明第57页

本篇论文共57页,点击这进入下载页面
 
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