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重组人β防御素-2抗胃癌BGC823活性研究
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重组人β防御素-2抗胃癌BGC823活性研究
论文目录
 
中文摘要第1-4页
英文摘要第4-9页
第一章 前言第9-15页
第二章 实验材料第15-23页
　　2.1 质粒、细胞株第15页
　　2.2 实验试剂及耗材第15-16页
　　2.3 实验主要仪器设备第16-17页
　　2.4 引物设计第17-18页
　　2.5 主要试剂以及配置第18-23页
第三章 实验方法第23-41页
　　3.1 真核表达质粒pCMV-hBD2重组第23-30页
　　　　3.1.1 菌株的扩大培养第23-24页
　　　　3.1.2 DNA质粒提取第24-25页
　　　　3.1.3 双酶切反应第25页
　　　　3.1.4 DNA琼脂糖凝胶电泳后目的产物回收第25-27页
　　　　3.1.5 连接反应第27页
　　　　3.1.6 转化第27-28页
　　　　3.1.7 重组质粒DNA获取第28-29页
　　　　3.1.8 重组质粒pCMV-hBD2检测第29-30页
　　　　3.1.9 菌株冻存第30页
　　3.2 细胞培养第30-32页
　　　　3.2.1 细胞培养前准备第30页
　　　　3.2.2 细胞复苏第30-31页
　　　　3.2.3 细胞传代第31页
　　　　3.2.4 细胞冻存第31-32页
　　3.3 细胞转染第32-33页
　　　　3.3.1 细胞准备第32页
　　　　3.3.2 转染溶液配置第32页
　　　　3.3.3 瞬时转染第32-33页
　　3.4 荧光实时定量PCR第33-35页
　　　　3.4.1 各细胞总RNA提取第33页
　　　　3.4.2 RNA浓度测定第33页
　　　　3.4.3 RNA逆转录cDNA第33-34页
　　　　3.4.4 荧光定量PCR第34-35页
　　3.5 细胞增殖实验第35页
　　　　3.5.1 细胞准备第35页
　　　　3.5.2 MTS法检测第35页
　　3.6 肿瘤细胞克隆形成实验第35-36页
　　　　3.6.1 克隆细胞培养第35-36页
　　　　3.6.2 结晶紫染色计数第36页
　　3.7 Transwell迁移及侵袭小室第36-37页
　　　　3.7.1 肿瘤细胞饥饿处理第36页
　　　　3.7.2 肿瘤侵袭实验预铺胶第36页
　　　　3.7.3 肿瘤迁移、侵袭实验第36页
　　　　3.7.4 结晶紫染色计数第36-37页
　　3.8 Western blotting第37-40页
　　　　3.8.1 细胞总蛋白提取第37页
　　　　3.8.2 BCA法测定蛋白定量第37-38页
　　　　3.8.3 制胶第38页
　　　　3.8.4 蛋白电泳第38页
　　　　3.8.5 电转移第38-39页
　　　　3.8.6 免疫印记第39页
　　　　3.8.7 Western blotting结果分析第39-40页
　　3.9 数据统计分析第40-41页
第四章 实验结果第41-45页
　　4.1 重组真核表达载体pCMV-hBD2第41页
　　4.2 瞬时转染hBD2表达情况第41-42页
　　　　4.2.1 mRNA水平检测hBD2表达情况第41-42页
　　　　4.2.2 蛋白水平检测hBD2表达情况第42页
　　4.3 hBD2对细胞增殖及克隆的影响第42-43页
　　　　4.3.1 hBD2对细胞增殖的影响第42页
　　　　4.3.2 hBD2对细胞克隆的影响第42-43页
　　4.4 hBD2对细胞迁移及侵袭的影响第43-44页
　　　　4.4.1 hBD2对BGC823迁移的影响第43页
　　　　4.4.2 hBD2对BGC823侵袭的影响第43-44页
　　4.5 检测影响对胃腺癌BGC823细胞MMP2表达的影响第44-45页
　　　　4.5.1 荧光实时定量PCR检测MMP2表达第44页
　　　　4.5.2 Western blotting检测hBD2对MMP2表达情况第44-45页
第五章 讨论第45-48页
第六章 结论第48-49页
第七章 参考文献第49-54页
第八章 图片附录第54-66页
在校期间的研究成果第66-67页
致谢第67页

本篇论文共67页，点击这进入下载页面。
 
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