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连翘属抗寒相关基因GPAT的克隆、表达及功能分析

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连翘属抗寒相关基因GPAT的克隆、表达及功能分析
论文目录
 
摘要第11-11页
Abstract第11-13页
第一章 综述第13-21页
  1.1 低温胁迫第13-14页
  1.2 植物膜质与植物抗逆第14-15页
  1.3 植物耐寒基因研究进展第15-17页
  1.4 GPAT研究进展第17-19页
  1.5 连翘研究进展第19-21页
第二章 连翘属GPAT基因克隆与序列分析第21-39页
  2.1 实验材料第21-22页
    2.1.1 植物材料第21页
    2.1.2 质粒与菌株第21页
    2.1.3 酶与其他试剂第21页
    2.1.4 溶液和培养基配制第21页
    2.1.5 仪器及生物学软件第21-22页
  2.2 试验方法第22-28页
    2.2.1 连翘属总RNA的提取第22-23页
    2.2.2 反转录合成第一链cDNA第23页
    2.2.3 金钟连翘FsGPAT基因5'端克隆第23-25页
    2.2.4 连翘属GPAT基因全长克隆第25-28页
  2.3 结果与分析第28-38页
    2.3.1 连翘属GPAT基因克隆第28-29页
    2.3.2 连翘属GPAT基因序列分析第29-31页
    2.3.3 GPATN端结构域第31-32页
    2.3.4 LPLAT结构域第32页
    2.3.5 连翘GPAT蛋白亚细胞定位预测第32-33页
    2.3.6 连翘GPAT蛋白质膜定位预测第33-35页
    2.3.7 连翘GPAT蛋白结构预测第35页
    2.3.8 同源性比对分析第35-38页
  2.4 小结第38-39页
第三章 FsGPAT基因载体构建及遗传转化第39-49页
  3.1 材料第39页
    3.1.1 菌种和载体第39页
    3.1.2 酶和试剂第39页
    3.1.3 溶液和培养基配制第39页
    3.1.4 实验仪器第39页
  3.2 试验方法第39-45页
    3.2.1 pCAMBIA-FsGPAT真核表达载体构建第39-42页
    3.2.2 pCAMBIA1302-F sGPAT重组质粒转化农杆菌LBA4404第42-43页
    3.2.3 转FsGPAT基因农杆菌侵染烟草第43-44页
    3.2.4 转FsGPAT基因烟草检测第44-45页
  3.3 结果与分析第45-47页
    3.3.1 pCAMBIA1302-FsGPAT重组质粒第45-46页
    3.3.2 转FsGPAT基因转农杆菌第46页
    3.3.3 转FsGPAT基因农杆菌PCR检测第46-47页
    3.3.4 转FsGPAT基因烟草检测第47页
  3.4 小结第47-49页
第四章 连翘属GPAT表达量分析第49-56页
  4.1 qPCR法分析连翘中GPAT相对表达量变化第49-51页
    4.1.1 试验方法第49-50页
    4.1.2 结果分析第50-51页
  4.2 酶联免疫吸附法分析连翘中GPAT含量变化第51-54页
    4.2.1 植物材料第51-52页
    4.2.2 其他试剂第52页
    4.2.3 实验仪器第52页
    4.2.4 试验方法第52页
    4.2.5 结果分析第52-54页
  4.3 小结第54-56页
第五章 结论第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-66页
攻读学位论文期间发表文章第66-67页

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