论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
1.1 药用真菌概述 | 第12页 |
1.2 灵芝的研究进展 | 第12-13页 |
1.3 真菌免疫调节蛋白的(FIPs)的研究进展 | 第13-20页 |
1.3.1 真菌免疫调节蛋白家族的简介 | 第13-14页 |
1.3.2 FIP家族的结构特征 | 第14-17页 |
1.3.3 FIP的生物学功能 | 第17-19页 |
1.3.4 FIP重组表达的研究进展 | 第19-20页 |
1.4 树舌灵芝的研究进展 | 第20-22页 |
1.4.1 树舌化学成分的研究进展 | 第20-21页 |
1.4.2 树舌灵芝的药理活性 | 第21-22页 |
1.4.3 树舌的毒性 | 第22页 |
1.4.4 树舌灵芝FIP的研究进展 | 第22页 |
1.5 本论文研究目的 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 菌种与质粒 | 第24页 |
2.1.2 试剂 | 第24页 |
2.1.3 仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 培养基 | 第25页 |
2.2 试验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 FIPs基因的合成 | 第25页 |
2.2.2 诱导型重组表达载体pPIC9-His-FIP-gap1/2、pPIC9-His-Lz-8和pPIC9-His-FIP-gsi的构建 | 第25-29页 |
2.2.3 重组毕赤酵母转化子的获得 | 第29-30页 |
2.2.4 FIP-gap1/2、Lz-8和FIP-gsi的表达、纯化及Western blot分析 | 第30-32页 |
2.2.5 rFIP-gap1/2的生物学活性验证及与rLz-8和rFIP-gsi蛋白生物学活性的比较 | 第32-35页 |
2.2.6 统计学处理 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-53页 |
3.1 FIPs基因的合成 | 第36-37页 |
3.1.1 FIP-gap1/2密码子优化及基因合成 | 第36页 |
3.1.2 LZ-8和FIP-gsi基因合成 | 第36-37页 |
3.2 重组毕赤酵母表达载体的构建 | 第37-40页 |
3.3 重组酵母转化子的菌落PCR鉴定 | 第40-42页 |
3.4 rFIP-gap1/2、rLz-8和rFIP-gsi的表达、纯化及Western blot分析 | 第42-44页 |
3.5 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi体外生物学功能验证 | 第44-53页 |
3.5.1 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi血细胞凝集活性测定 | 第44-45页 |
3.5.2 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促脾淋巴细胞增殖活性测定 | 第45-46页 |
3.5.3 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促细胞因子白介素IL-2分泌活性测定 | 第46-47页 |
3.5.4 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi促细胞因子白介素IFN-γ分泌活性测定 | 第47-48页 |
3.5.5 rFIP-gap1/2、rLZ-8和rFIP-gsi抗肿瘤活性测定 | 第48-53页 |
第四章 讨论与结论 | 第53-56页 |
4.1 讨论 | 第53-55页 |
4.2 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录: 英文缩写词 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表的学术文章 | 第65页 |