论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 石油污染土壤情况概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 石油污染土壤现状 | 第14页 |
| 1.1.2 石油污染对人类和土壤环境的危害 | 第14-15页 |
| 1.2 植物在修复中的作用 | 第15-16页 |
| 1.2.1 植物修复的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物修复的机理 | 第16页 |
| 1.2.3 紫茉莉 | 第16页 |
| 1.3 XTH的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 XTH与细胞壁的重构 | 第16-17页 |
| 1.3.2 XTHs的酶活性质和家族分类 | 第17-18页 |
| 1.3.3 XTH与非生物胁迫 | 第18-19页 |
| 1.4 本试验的研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 紫茉莉实时荧光定量PCR和抗逆性生理功能分析 | 第20-38页 |
| 2.1 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料前期处理 | 第20页 |
| 2.1.2 反转录合成第一条链 | 第20-21页 |
| 2.1.3 内参基因和待测基因的引物合成 | 第21页 |
| 2.1.4 qRT-PCR扩增 | 第21页 |
| 2.2 紫茉莉抗逆性生理功能分析 | 第21-26页 |
| 2.2.1 试验材料与试剂 | 第21-23页 |
| 2.2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.2.1.2 试验试剂 | 第21-23页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.2.1 材料的处理 | 第23页 |
| 2.2.2.2 可溶性蛋白含量的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.2.3 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第24页 |
| 2.2.2.4 过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第24-25页 |
| 2.2.2.5 过氧化氢(CAT)活性的测定 | 第25页 |
| 2.2.2.6 丙二醛含量测定 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-36页 |
| 2.3.1 紫茉莉总RNA的提取 | 第26页 |
| 2.3.2 实时荧光定量PCR溶解曲线 | 第26-27页 |
| 2.3.3 XTH基因的qRT-PCR的扩增结果 | 第27页 |
| 2.3.4 可溶性蛋白含量测定结果 | 第27-30页 |
| 2.3.5 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定结果 | 第30-31页 |
| 2.3.6 过氧化物酶(POD)活性的测定结果 | 第31-33页 |
| 2.3.7 过氧化氢(CAT)活性的测定结果 | 第33-35页 |
| 2.3.8 丙二醛含量测定结果 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第36-38页 |
| 第三章 MirXIH基因的表达载体的构建 | 第38-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 3.1.2 载体与菌株 | 第38页 |
| 3.1.3 酶和试剂 | 第38页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第38-39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 PCR扩增 | 第39-40页 |
| 3.2.2 目的基因与TA克隆载体连接和转化 | 第40页 |
| 3.2.3 阳性克隆的筛选 | 第40页 |
| 3.2.4 pCAMBIA 1302-MirXTH重组表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.5 工程农杆菌的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.3.1 紫茉莉XTH基因的克隆检测 | 第42页 |
| 3.3.2 重组克隆载体pMD18-T-MirXTH菌落PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3.3 pMD18-T-MirXTH质粒和pCAMBIA 1302质粒DNA的双酶切结果 | 第43-44页 |
| 3.3.4 菌落PCR检测pCAMBIA 1302-MirXTH重组表达载体 | 第44-45页 |
| 3.3.5 pCAMBIA 1302-MirXTH重组表达载体的双酶切鉴定 | 第45页 |
| 3.3.6 pCAMBIA 1302-MirXTH重组质粒转化农杆菌LBA4404 | 第45页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第45-47页 |
| 第四章 紫茉莉XTH的生物信息学分析和亚细胞定位 | 第47-61页 |
| 4.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 4.1.2 载体与菌株 | 第47页 |
| 4.1.3 酶和试剂 | 第47页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第47-48页 |
| 4.2 方法 | 第48-52页 |
| 4.2.1 生物信息学分析 | 第48页 |
| 4.2.2 紫茉莉总RNA提取 | 第48页 |
| 4.2.3 XTH的亚细胞定位目的基因的克隆 | 第48-49页 |
| 4.2.4 PCR扩增产物胶回收 | 第49页 |
| 4.2.5 目的基因与TA克隆载体连接和转化 | 第49页 |
| 4.2.6 阳性克隆的筛选 | 第49页 |
| 4.2.7 pCAMBIA 1302-MirXTH重组植物表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 4.2.8 基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第50-51页 |
| 4.2.9 激光共聚焦显微镜观察洋葱表皮细胞 | 第51-52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-60页 |
| 4.3.1 XTH基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第52-56页 |
| 4.3.2 紫茉莉根部总RNA的提取 | 第56-57页 |
| 4.3.3 PCR反应扩增目的片段 | 第57页 |
| 4.3.4 重组克隆载体pMD18-T-MirXTH的菌落PCR鉴定 | 第57页 |
| 4.3.5 pMD18-T-MirXTH和pCAMBIA 1302质粒DNA的双酶切结果 | 第57-58页 |
| 4.3.6 重组载体的菌落PCR | 第58页 |
| 4.3.7 重组载体的双酶切鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3.8 基因枪转化 | 第59-60页 |
| 4.4 讨论与结论 | 第60-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
