论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 IRAK家族成员及其结构特征 | 第10-12页 |
| 1.1.1 IRAK家族成员 | 第10-11页 |
| 1.1.2 IRAK家族蛋白的结构特征 | 第11-12页 |
| 1.2 IRAK家族成员在IL-1β细胞信号通路中的地位 | 第12-13页 |
| 1.2.1 IL-1β信号通路概况 | 第12-13页 |
| 1.2.2 IRAK家族成员在IL-1β信号通路中的功能 | 第13页 |
| 1.3 低等动物IRAK相关信号通路研究概述 | 第13-14页 |
| 1.4 本研究的目的和内容 | 第14-16页 |
| 第二章 草鱼IRAK-4 的分子克隆及其生物信息学分析 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.2 实验方法与操作 | 第16-27页 |
| 2.2.1 RNA的提取及CDNA的制备 | 第16-17页 |
| 2.2.2 草鱼IRAK-4 CDNA部分序列的扩增 | 第17-20页 |
| 2.2.3 草鱼IRAK-4 CDNA末端扩增 | 第20-24页 |
| 2.2.4 草鱼IRAK-4 编码序列的高保真酶确认 | 第24-25页 |
| 2.2.5 草鱼IRAK-4 氨基酸序列与蛋白质比对 | 第25-26页 |
| 2.2.6 草鱼IRAK-4 功能域分析 | 第26页 |
| 2.2.7 多序列比对与系统发育树的构建 | 第26页 |
| 2.2.8 草鱼IRAK-43D模型的构建。 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-32页 |
| 2.3.1 草鱼IRAK-4 的CDNA全长及氨基酸序列信息 | 第27-30页 |
| 2.3.2 草鱼IRAK-4 的功能域预测 | 第30页 |
| 2.3.3 草鱼IRAK-4 的系统发育树构建 | 第30-31页 |
| 2.3.4 草鱼IRAK-43D模型的构建及比较 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 草鱼IRAK-4 的组织分布及诱导表达 | 第34-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 实验方法与操作 | 第34-35页 |
| 3.2.1 RNA提取及CDNA模板的制备 | 第34页 |
| 3.2.2 草鱼头肾白细胞（HKLS）的分离、培养及处理 | 第34-35页 |
| 3.2.3 嗜水气单胞杆菌感染草鱼模型 | 第35页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR（QPCR） | 第35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-39页 |
| 3.3.1 草鱼IRAK-4 与IL-1β的组织分布 | 第35-37页 |
| 3.3.2 IL-1β体外刺激对草鱼IRAK-4 表达的影响 | 第37页 |
| 3.3.3 嗜水气单胞菌感染对草鱼IRAK-4 和IL-1β表达的影响 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 草鱼IRAK-4 的功能研究 | 第40-47页 |
| 4.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.2 实验方法与操作 | 第40-42页 |
| 4.2.1 草鱼IRAK-4 绿色荧光蛋白融合表达载体构建 | 第40-41页 |
| 4.2.2 草鱼肾细胞系（CIK）的培养及瞬时转染 | 第41-42页 |
| 4.2.3 荧光素酶检测系统 | 第42页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR（QPCR） | 第42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-45页 |
| 4.3.1 瞬时表达IRAK-4 对NFκB信号通路的影响 | 第42-43页 |
| 4.3.2 瞬时表达IRAK-4 及其功能域缺失突变体对IL-1β自我调节的影响 | 第43-45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 总结 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第53-54页 |
