论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8
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| ABSTRACT | 第8-12
页 |
| 第一章 前言 | 第12-23
页 |
| · 血管内皮细胞生长因子（VEGF）的研究现状 | 第12-13
页 |
| · VEGF 概述 | 第12
页 |
| · VEGF 家族 | 第12
页 |
| · VEGF 的分子结构 | 第12-13
页 |
| · VEGF 的功能 | 第13
页 |
| · VEGF 的表达分布 | 第13
页 |
| · 血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR）的研究现状 | 第13-20
页 |
| · VEGFR 概述 | 第13
页 |
| · VEGFR 家族 | 第13-19
页 |
| · VEGFR 的表达调控 | 第19-20
页 |
| · VEGFR 与肿瘤的关系 | 第20-21
页 |
| · VEGFR 与肿瘤发生 | 第20-21
页 |
| · VEGFR 与肿瘤的发展 | 第21
页 |
| · 抗肿瘤治疗前景 | 第21-23
页 |
| 第二章 VEGFR-1 原核表达载体的构建及鉴定 | 第23-39
页 |
| · 实验材料 | 第23-27
页 |
| · 材料及试剂 | 第23
页 |
| · 实验仪器 | 第23-24
页 |
| · 主要溶液配制 | 第24-27
页 |
| · 实验方法 | 第27-33
页 |
| · 化学合成目的基因片段 | 第27
页 |
| · 目的基因的扩增 | 第27-29
页 |
| · 质粒的提取 | 第29-30
页 |
| · pET-28a（+）/VEGFR-1 表达载体的构建 | 第30-31
页 |
| · 感受态细胞的制备 | 第31-32
页 |
| · 连接产物的转化及重组质粒的筛选与鉴定 | 第32-33
页 |
| · 实验结果 | 第33-36
页 |
| · 目的基因PCR 扩增结果 | 第33-34
页 |
| · 重组质粒的鉴定 | 第34-36
页 |
| · 讨论 | 第36-39
页 |
| · 目的基因VEGFR-1 的获得 | 第36
页 |
| · 引物设计的原则 | 第36
页 |
| · 引物使用及保存 | 第36-37
页 |
| · 引物熔解温度（Tm） | 第37
页 |
| · PCR 产物纯化 | 第37
页 |
| · 提取质粒 | 第37
页 |
| · 原核表达载体pET28a（+）的选择 | 第37-38
页 |
| · pET-28a（+）/ VEGFR-1 表达重组体的构建和鉴定 | 第38-39
页 |
| 第三章 重组VEGFR-1 基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第39-59
页 |
| · 材料与方法 | 第39-47
页 |
| · 实验材料 | 第39-42
页 |
| · 实验方法 | 第42-47
页 |
| · 实验结果 | 第47-55
页 |
| · 重组工程菌BL21/VEGFR-1 的表达结果和目标蛋白表达形式检测 | 第47-49
页 |
| · 重组工程菌BL21/ VEGFR-1 的最佳表达条件的摸索 | 第49-53
页 |
| · 凝胶层析（分子筛层析）进一步纯化蛋白VEGFR-1 | 第53-55
页 |
| · 重组VEGFR-1 目的蛋白免疫印迹鉴定结果 | 第55
页 |
| · 目的蛋白含量测定的结果 | 第55
页 |
| · 讨论 | 第55-59
页 |
| · 表达宿主菌的选择 | 第55-56
页 |
| · 融合标签用于蛋白的纯化 | 第56
页 |
| · 最适表达条件的优化 | 第56-57
页 |
| · 缓冲液pH 值 | 第57
页 |
| · 保持重组蛋白活性 | 第57
页 |
| · 可溶重组蛋白的分离纯化 | 第57
页 |
| · Western blotting 分析 | 第57-58
页 |
| · 晶体的培养 | 第58
页 |
| · 动物实验 | 第58-59
页 |
| 结论 | 第59-60
页 |
| 参考文献 | 第60-68
页 |
| 致谢 | 第68-69
页 |
| 附录 | 第69页 |
