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携带SOCS3的溶瘤腺病毒对结肠癌的治疗研究

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携带SOCS3的溶瘤腺病毒对结肠癌的治疗研究
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-15页
第一章 综述第15-23页
  · 背景第15页
  · 结肠癌的分类第15-16页
  1.3 CRC 发生的分子机制第16页
  1.4 SOCS3 及其家族第16-18页
    1.4.1 SOCS 家族第16-17页
    1.4.2 SOCS3 基因的选择第17-18页
  1.5 JAK/STAT 信号通路的研究第18页
  1.6 SOCS3 与JAK/STAT 信号通路的研究第18-19页
  1.7 JAK/STAT 信号通路与结肠癌第19页
  · 溶瘤腺病毒第19-21页
    · 腺病毒的研究现状第19-20页
    · 溶瘤腺病毒作用机理第20-21页
    1.8.3 携带SOCS3 溶瘤腺病毒第21页
  · 本研究课题的来源和主要创新点第21-22页
    · 课题的来源第21页
    · 课题创新点第21-22页
  · 课题流程示意图第22-23页
第二章:实验材料及仪器第23-28页
  · 实验材料第23-25页
    · 病毒株第23页
    · 细胞株第23页
    · 实验动物第23-24页
    · 实验耗材第24-25页
  · 实验仪器第25-26页
  · 实验试剂第26-28页
    · 细胞培养液相关试剂第26页
    · 蛋白电泳相关试剂第26-28页
第三章 实验方法第28-39页
  · 小剂量扩增病毒及病毒鉴定鉴定第28-29页
    3.1.1 HEK293 细胞计数、铺板及病毒感染第28页
    3.1.2 病毒DNA 抽提第28页
    3.1.3 PCR 鉴定病毒基因组第28-29页
  · 病毒大量扩增、病毒纯化以及病毒滴度测定第29-31页
    · 病毒大量扩增第29页
    · 病毒收集第29页
    · 病毒纯化第29-30页
    3.2.4 病毒的滴定(TCID50 法)第30-31页
  · 目的病毒在不同细胞中复制能力的测定第31页
  · 体外实验研究第31-33页
    3.4.1 MTT 细胞杀伤试验检测病毒对细胞的杀伤作用第31页
    3.4.2 结肠癌细胞系中SOCS3 以及STAT3 信号通路相关蛋白的检测第31-33页
      · 结肠癌细胞总蛋白样品的收集第31页
      · 瘤组织和肠组织中总蛋白样品的收集第31-32页
      3.4.2.3 总蛋白定量(BCA 法)第32页
      3.4.2.4 Western-blot 检测相关蛋白表达第32-33页
  3.5 STAT3 信号通路相关癌基因m RNA 的检测第33-35页
    3.5.1 结肠癌细胞总RNA 的提取第33页
    3.5.2 cDNA 的合成第33-34页
    3.5.3 肿瘤及大肠组织中总m RNA 的抽提第34页
    3.5.4 qRT-PCR 定量癌症相关基因m RNA 丰度第34-35页
  3.6 SOCS3 诱导肿瘤细胞凋亡第35-36页
    · 细胞的计数及铺板第35页
    3.6.2 HT-29 细胞的Hoechst 染色第35-36页
  3.7 携带SOCS3 的溶瘤腺病毒在结肠癌移植瘤内实验研究第36-39页
    · 裸鼠结肠癌移植瘤的成瘤第36-37页
      · 裸鼠的准备第36页
      3.7.1.2 SW620 细胞的准备第36页
      3.7.1.3 皮下注射SW620 细胞成瘤第36页
      · 裸鼠分组及病毒注射第36-37页
    · 肿瘤大小测量,监测病毒疗效第37页
    · 移植瘤组织标本取材第37页
    3.7.4 免疫组化检测肿瘤组织中STAT3、p-STAT3、Bcl-2 和Bcl-x1第37页
    3.7.5 肿瘤组织H&E 染色分析第37-39页
第四章 结果与分析第39-50页
  4.1 AdCN305-cppSOCS3 病毒鉴定第39页
  · 目的病毒在不同细胞中的复制能力第39-40页
  4.3 MTT 细胞杀伤试验检测病毒对细胞的杀伤作用第40-41页
  4.4 SOCS3 蛋白在结肠癌细胞中本底表达第41-42页
  4.5 STAT3 蛋白在结肠癌细胞中的磷酸化水平第42-43页
  4.6 注射病毒后移植瘤内SOCS3 蛋白的表达第43页
  4.7 SOCS3 蛋白对STAT3 磷酸化及下游效应因子表达的抑制第43-46页
    4.7.1 肿瘤组织和正常组织中STAT3 下游效应基因的m RNA 检测第43-45页
    4.7.2 结肠癌细胞中STAT3 下游效应基因的m RNA 检测第45-46页
  4.8 SOCS3 诱导肿瘤细胞凋亡第46-47页
  · 目的病毒表结肠癌移植瘤移植瘤体内实验研究第47-48页
  4.10 移植瘤组织免疫组化和 H&E 染色第48-50页
第五章 讨论与结论第50-53页
  · 讨论第50-52页
  · 结论第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-60页
硕士期间发表论文第60 页

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