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携带miR-122的腺病毒联合化疗药物对肝癌细胞杀伤作用研究及肝癌中miRNA与表现遗传机制的相互作用研究

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携带miR-122的腺病毒联合化疗药物对肝癌细胞杀伤作用研究及肝癌中miRNA与表现遗传机制的相互作用研究
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第12-15页
第一章 携带miR-122 的腺病毒联合化疗药物对肝癌细胞杀伤作用研究第15-40页
  · 前言第15-22页
    · 肝癌的化学治疗第15-17页
    1.1.2 MicroRNA 与肿瘤基因治疗第17-19页
    · microRNA-122(miR-122)在肝癌中的研究概况第19-20页
    · 本课题来源及研究意义第20-22页
  · 实验材料与方法第22-25页
    · 生化试剂第22页
    · 主要仪器第22-23页
    · 主要溶液的配制第23-24页
    · 细胞株系及培养条件第24-25页
  · 实验方法第25-32页
    · 细胞有关操作第25-27页
    1.3.2 腺病毒Ad-miR122 大量扩增与纯化第27页
    1.3.3 腺病毒Ad-miR122 滴度测定第27-28页
    1.3.4 CCK-8 检测腺病毒与化疗药物单独或联合使用对肝癌细胞增殖能力的影响第28-29页
    · 腺病毒与化疗药物单独或联合使用对耐药基因表达的影响第29-30页
    · 流式细胞仪检测细胞凋亡第30-31页
    · 流式细胞仪检测细胞周期第31页
    · 统计学分析第31-32页
  · 实验结果第32-37页
    · 腺病毒滴度的测定第32页
    1.4.2 腺病毒Ad-miR122 与化疗药物联合诱导杀伤肿瘤细胞作用第32-35页
    · 腺病毒与化疗药物对耐药基因表达的影响第35-36页
    · 流式细胞仪检测细胞凋亡第36-37页
    · 流式细胞仪检测细胞周期第37页
  · 讨论第37-40页
第二章 肝癌中miRNA 与表观遗传机制的相互作用研究第40-77页
  · 前言第40-46页
    2.1.1 表观遗传与miRNA 之间相互调控诱发肿瘤形成第40-41页
    2.1.2 表观遗传调控miRNA 的表达方式及机制第41-43页
    2.1.3 miRNA 调控表观遗传的方式及机制第43-44页
    · 肝癌中的表观遗传现象第44-45页
    2.1.5 肝癌相关的miRNA 研究现状第45-46页
    · 课题设计第46页
  · 本课题的来源及意义第46-48页
    · 课题来源第46页
    · 课题意义第46-47页
    · 学位论文的创新点、重点、难点和关键问题第47页
    · 课题的实验流程第47-48页
  · 实验材料第48-50页
    · 菌株及质粒第48页
    · 工具酶及试剂第48页
    · 引物设计与合成第48-49页
    · 实验中涉及到的细胞株第49页
    · 主要仪器与设备第49页
    · 培养基及主要试剂的配制第49-50页
  · 实验方法第50-66页
    2.4.1 pMD-18-T-c-myc 载体的构建第50-53页
    2.4.2 c-myc-IRES-EGFP 的构建第53-55页
    2.4.3 c-myc-2A-EGFP 质粒的构建第55-57页
    2.4.4 慢病毒载体Lenti-PGK.P53 的构建第57-60页
    2.4.5 慢病毒载体Lv-c-myc.IRES 的构建第60-62页
    2.4.6 慢病毒载体Lv-c-myc.2A 的构建第62-63页
    · 质粒的制备纯化第63-64页
    2.4.8 慢病毒载体Lv-c-myc.2A 和Lv-c-myc.IRES 有效性检验第64页
    · 慢病毒的生产第64-65页
    · 慢病毒的纯化和感染第65-66页
    2.4.11 qRT-PCR 检测肝癌细胞系中c-myc mRNA 水平的表达第66页
    · 统计学分析第66页
  · 实验结果与分析第66-75页
    · 病毒载体系统的构建及鉴定结果第66-72页
    2.5.2 慢病毒载体Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 有效性检验第72页
    2.5.3 慢病毒Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 的生产第72-73页
    2.5.4 慢病毒Lv-c-myc.IRES 和Lv-c-myc.2A 的感染验证第73-74页
    2.5.5 c-myc 在肝癌细胞系和正常肝细胞株AKN-1 中的表达情况第74-75页
  · 讨论第75-77页
结论第77-78页
参考文献第78-82页
在学期间论文发表情况第82-83页
致谢第83 页

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