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毛竹抗病PheWRKY1基因的克隆与功能分析

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毛竹抗病PheWRKY1基因的克隆与功能分析
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 绪论第15-25页
  · 研究背景第15-22页
  · 本研究的目的与意义第22-23页
  · 研究的主要内容第23-24页
  · 技术路线第24-25页
第二章 研究材料与方法第25-48页
  · 实验材料第25-29页
    · 植物材料第25页
    · 菌株和载体第25-26页
    · 主要试剂第26页
    · 使用软件第26-27页
    · 主要使用仪器第27-28页
    · 引物第28-29页
  · 实验方法第29-48页
    · 目的基因的选择第29页
    · 毛竹叶片总RNA 提取与cDNA 第一链合成第29-30页
    · PCR 反应体系及产物的琼脂糖电泳第30-31页
    · PCR 产物回收第31页
    · PCR 产物与pMD18-T 载体的连接第31-32页
    · 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞第32-34页
    · 重组质粒的菌液PCR 鉴定第34页
    · 质粒DNA 的小量提取与酶切分析第34-36页
    · 序列的测定与分析第36页
    · 不同处理对PheWRKY1 基因转录水平表达的影响第36-39页
    · 植物过表达载体构建第39-40页
    · 菌种保藏第40页
    · 根癌农杆菌感受态细胞的制备第40-41页
    · 重组质粒转化根癌农杆菌感受态细胞(电击法)第41页
    · 农杆菌菌液PCR 鉴定第41页
    · 拟南芥培养第41-42页
    · 农杆菌介导的拟南芥转化第42页
    · 拟南芥的抗性筛选第42-43页
    · 转基因拟南芥基因组DNA 检测第43-44页
    · 拟南芥种子萌发与表型观察第44页
    · 细菌培养与拟南芥接种第44-45页
    · 拟南芥病程相关基因表达变化第45页
    · 拟南芥光合作用相关的叶绿素荧光参数差异第45-46页
    · 原核表达载体构建与PheWRKY1 蛋白的制备第46-48页
第三章 结果与分析第48-73页
  · 基因片段的克隆第48-49页
  · 生物信息学分析第49-54页
    · 蛋白序列聚类分析、保守性分析与蛋白三级结构预测第49-51页
    · 亚细胞定位分析第51页
    · 跨膜结构域分析第51-52页
    · 蛋白信号肽预测第52-53页
    · 蛋白功能预测第53-54页
  · 不同处理下PheWRKY1 基因的表达模式分析第54-61页
    · 毛竹总RNA 的提取与反转录第54-55页
    · 引物特异性检测第55页
    · 实时荧光定量PCR 扩增曲线和溶解曲线分析第55-58页
    · 几种处理在转录水平对PheWRKY1 基因表达的调控第58-60页
    · 自然发病林感病植株基因表达分析第60-61页
  · 目的基因原核表达第61-62页
  · 利用转基因拟南芥对目的基因进行功能分析第62-73页
    · 转基因拟南芥植株的获得第62-64页
    · 拟南芥T_2 代植株表型观察第64-65页
    · DC3000 侵染对拟南芥表型特征的影响第65页
    · DC3000 侵染后拟南芥光合荧光特性的变化第65-69页
    · 病程相关基因表达的变化第69-73页
第四章 结论与讨论第73-78页
  · 结论第73-74页
  · 讨论第74-77页
  · 展望第77-78页
参考文献第78-86页
附录第86-91页
在读期间的学术研究第91-93页
致谢第93页

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