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毛竹抗病PheWRKY1基因的克隆与功能分析
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毛竹抗病PheWRKY1基因的克隆与功能分析
论文目录
摘要
第1-7页
ABSTRACT
第7-15页
第一章 绪论
第15-25页
· 研究背景
第15-22页
· 本研究的目的与意义
第22-23页
· 研究的主要内容
第23-24页
· 技术路线
第24-25页
第二章 研究材料与方法
第25-48页
· 实验材料
第25-29页
· 植物材料
第25页
· 菌株和载体
第25-26页
· 主要试剂
第26页
· 使用软件
第26-27页
· 主要使用仪器
第27-28页
· 引物
第28-29页
· 实验方法
第29-48页
· 目的基因的选择
第29页
· 毛竹叶片总RNA 提取与cDNA 第一链合成
第29-30页
· PCR 反应体系及产物的琼脂糖电泳
第30-31页
· PCR 产物回收
第31页
· PCR 产物与pMD18-T 载体的连接
第31-32页
· 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞
第32-34页
· 重组质粒的菌液PCR 鉴定
第34页
· 质粒DNA 的小量提取与酶切分析
第34-36页
· 序列的测定与分析
第36页
· 不同处理对PheWRKY1 基因转录水平表达的影响
第36-39页
· 植物过表达载体构建
第39-40页
· 菌种保藏
第40页
· 根癌农杆菌感受态细胞的制备
第40-41页
· 重组质粒转化根癌农杆菌感受态细胞(电击法)
第41页
· 农杆菌菌液PCR 鉴定
第41页
· 拟南芥培养
第41-42页
· 农杆菌介导的拟南芥转化
第42页
· 拟南芥的抗性筛选
第42-43页
· 转基因拟南芥基因组DNA 检测
第43-44页
· 拟南芥种子萌发与表型观察
第44页
· 细菌培养与拟南芥接种
第44-45页
· 拟南芥病程相关基因表达变化
第45页
· 拟南芥光合作用相关的叶绿素荧光参数差异
第45-46页
· 原核表达载体构建与PheWRKY1 蛋白的制备
第46-48页
第三章 结果与分析
第48-73页
· 基因片段的克隆
第48-49页
· 生物信息学分析
第49-54页
· 蛋白序列聚类分析、保守性分析与蛋白三级结构预测
第49-51页
· 亚细胞定位分析
第51页
· 跨膜结构域分析
第51-52页
· 蛋白信号肽预测
第52-53页
· 蛋白功能预测
第53-54页
· 不同处理下PheWRKY1 基因的表达模式分析
第54-61页
· 毛竹总RNA 的提取与反转录
第54-55页
· 引物特异性检测
第55页
· 实时荧光定量PCR 扩增曲线和溶解曲线分析
第55-58页
· 几种处理在转录水平对PheWRKY1 基因表达的调控
第58-60页
· 自然发病林感病植株基因表达分析
第60-61页
· 目的基因原核表达
第61-62页
· 利用转基因拟南芥对目的基因进行功能分析
第62-73页
· 转基因拟南芥植株的获得
第62-64页
· 拟南芥T_2 代植株表型观察
第64-65页
· DC3000 侵染对拟南芥表型特征的影响
第65页
· DC3000 侵染后拟南芥光合荧光特性的变化
第65-69页
· 病程相关基因表达的变化
第69-73页
第四章 结论与讨论
第73-78页
· 结论
第73-74页
· 讨论
第74-77页
· 展望
第77-78页
参考文献
第78-86页
附录
第86-91页
在读期间的学术研究
第91-93页
致谢
第93页
本篇论文共
93
页,
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