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犬细小病毒VP
2
基因的克隆、表达与鉴定
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犬细小病毒VP
2
基因的克隆、表达与鉴定
论文目录
中文摘要
第1-8页
英文摘要
第8-9页
第一部分 研究动态
第9-20页
一.前言
第9-18页
·犬细小病毒的生物学特性
第9-11页
· 形态特点
第9页
· 理化性质
第9-10页
· 血凝性
第10页
· 抗原性
第10-11页
·犬细小病毒的基因组结构及其编码的蛋白质
第11-12页
· 基因组结构特点
第11-12页
· 编码的蛋白质
第12页
·犬细小病毒的衣壳结构及其功能区
第12-14页
· 衣壳结构特点
第12-13页
· 衣壳结构功能区
第13-14页
·流行病学及致病机理
第14-15页
· 流行病学
第14页
· 致病机理
第14-15页
·发病的临床表现及其病理变化
第15页
· 出血性肠炎型
第15页
· 心肌病变型
第15页
· 肺病变型
第15页
·犬细小病毒疫苗的开发研制
第15-17页
· 同源灭活苗
第15页
· 同源弱毒苗
第15-16页
· 新型疫苗的研究状况
第16-17页
·犬细小病毒的诊断检测
第17-18页
· 电镜诊断
第17页
· 血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)
第17页
· 酶联免疫吸附试验(ELISA)
第17页
· 聚合酶链反应技术(PCR)
第17-18页
· 其它
第18页
二.研究的目的和意义
第18-20页
第二部分 实验研究
第20-46页
第1章 犬细小病毒VP_2基因的克隆及其原核表达载体的构建
第20-32页
·材料
第20-21页
· 质粒、菌株和毒株
第20页
· 试剂
第20-21页
· 主要仪器
第21页
·方法
第21-25页
· 引物设计
第21页
· 病毒基因组DNA的提取
第21页
· PCR扩增及其产物的纯化回收
第21-22页
· 重组表达载体的构建
第22-24页
· 阳性重组质粒的鉴定
第24-25页
· 序列测定和蛋白质特性的分析
第25页
·结果与分析
第25-30页
· 病毒基因组DNA的提取
第25-26页
· VP_2基因的PCR扩增
第26页
· 重组表达载体的构建
第26-27页
· 重组质粒的鉴定
第27-28页
· 序列测定和蛋白质特性的分析
第28-30页
·讨论
第30-32页
· 酶切位点的设计
第30页
· 影响PCR扩增因素的探讨
第30页
· 目的基因的选择
第30-31页
· 表达载体的构建
第31-32页
第2章 犬细小病毒VP_2基因的原核表达及其产物的纯化鉴定
第32-46页
·材料
第32页
· 质粒与菌株
第32页
· 实验动物
第32页
· 主要试剂
第32页
· 主要仪器
第32页
·方法
第32-36页
· VP_2基因的密码子分析
第33页
· 重组质粒在不同宿主菌中的诱导表达
第33页
· 重组质粒表达条件的优化
第33-34页
· 融合蛋白的可溶性分析
第34页
· 目的蛋白的纯化与复性
第34-35页
· 间接ELISA反应条件的确立
第35-36页
·结果与分析
第36-43页
· VP_2基因的密码子分析
第36-37页
· 重组质粒在不同宿主菌中的诱导表达
第37-38页
· 重组质粒表达条件的优化
第38-39页
· 融合蛋白的可溶性分析
第39页
· 目的蛋白的纯化
第39-40页
· 间接ELISA反应条件的确立
第40-43页
·讨论
第43-46页
· 影响原核表达的因素
第43页
· 表达系统的选择
第43-44页
· 关于包涵体的变性溶解
第44页
· 关于目的蛋白的纯化复性
第44-45页
· 表达产物的活性鉴定
第45-46页
全文总结
第46-47页
参考文献
第47-54页
附录
第54-56页
致谢
第56页
本篇论文共
56
页,
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。
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