论文目录 | |
摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
中英符号缩略表 | 第10-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 樱桃病毒病发生概况 | 第12-13页 |
1.1.1 地理分布 | 第12页 |
1.1.2 樱桃病毒病研究现状及分析 | 第12-13页 |
1.2 樱桃主要病毒、危害及特性 | 第13-15页 |
1.2.1 李属坏死环斑病毒(Prunus necrotic ring spot virus, PNRSV) | 第13页 |
1.2.2 李矮缩病毒(Prunus dwarf virus, PDV) | 第13页 |
1.2.3 樱桃病毒A(Cherry virus A, CVA) | 第13-14页 |
1.2.4 樱桃绿环斑驳病毒(Cherry green ring mottlevirus, CGRMV) | 第14-15页 |
1.2.5 苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leafspot virus, ACLSV) | 第15页 |
1.2.6 樱桃锉叶病毒(Cherry rasp leaf virus, CRLV)及樱桃小果病毒(Little cherry virus, LChV) | 第15页 |
1.3 樱桃病毒检测方法研究 | 第15-18页 |
1.3.1 樱桃病毒病症状诊断法 | 第16页 |
1.3.2 电子显微镜检测 | 第16页 |
1.3.3 分子生物学检测 | 第16-18页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
第二章 新疆石河子地区设施樱桃病毒病害调查及病原病毒的鉴定 | 第20-40页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 样品采集及调查地点 | 第20-21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-26页 |
2.2.1 樱桃病毒病症状类型及发病情况的调查 | 第21页 |
2.2.2 数据处理 | 第21页 |
2.2.3 病毒形态电镜观察 | 第21页 |
2.2.4 病毒基因克隆 | 第21-26页 |
2.2.5 序列测定及分析 | 第26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-39页 |
2.3.1 石河子地区设施樱桃田间发病症状 | 第26-27页 |
2.3.2 樱桃病原病毒电镜观察及分析 | 第27-28页 |
2.3.3 设施樱桃病毒分子鉴定 | 第28-29页 |
2.3.4 石河子地区樱桃病毒分离物与其他分离物同源性及进化关系分析 | 第29-37页 |
2.3.5 石河子地区设施樱桃樱桃病毒检出率 | 第37-39页 |
2.4 结论与讨论 | 第39-40页 |
第三章 樱桃病毒PNRSV、CGRMV、PDV多重RT-PCR检测方法的建立与应用 | 第40-48页 |
3.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41页 |
3.2.1 植物组织总RNA的提取 | 第41页 |
3.2.2 引物设计 | 第41页 |
3.2.3 多重RT-PCR检测 | 第41页 |
3.2.4 PCR产物的克隆及测序 | 第41页 |
3.2.5 多重RT- PCR主要影响因素的优化 | 第41页 |
3.2.6 多重RT-PCR检测方法的实际应用 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 单重RT-PCR扩增结果 | 第41-42页 |
3.3.2 多重RT-PCR体系建立 | 第42-43页 |
3.3.3 多重RT- PCR检测体系优化 | 第43-45页 |
3.3.4 多重RT-PCR的灵敏度分析 | 第45-46页 |
3.3.5 PCR扩增产物序列分析 | 第46页 |
3.3.6 应用多重RT-PCR技术检测新疆石河子地区樱桃带毒情况 | 第46页 |
3.4 结论与讨论 | 第46-48页 |
第四章 新疆石河子地区樱桃病毒分离物CVA-SHZ基因组全序列分析 | 第48-58页 |
4.1 材料与方法 | 第48-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第48页 |
4.1.2 主要试剂 | 第48页 |
4.1.3 引物合成 | 第48-49页 |
4.1.4 植物组织总RNA的提取 | 第49页 |
4.1.5 RT-PCR反应 | 第49页 |
4.1.6 PCR产物的回收与克隆 | 第49页 |
4.1.7 序列测定及分析 | 第49-50页 |
4.2 结果与分析 | 第50-56页 |
4.2.1 RT-PCR扩增结果 | 第50页 |
4.2.2 CVA-SHZ全基因组序列扩增 | 第50-51页 |
4.2.3 CVA-SHZ基因组结构分析 | 第51-52页 |
4.2.4 CVA-SHZ全基因及基因组结构与Capillovirus属病毒其它CVA分离物的同源性比较 | 第52-54页 |
4.2.5 樱桃病毒CVA-SHZ分离物的系统进化关系分析 | 第54-56页 |
4.3 结论与讨论 | 第56-58页 |
第五章 全文小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录A 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第65-66页 |
附录B 常用培养基及缓冲液配方 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第69页 |