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生防萎缩芽孢杆菌CAB-1菌株几丁质酶基因的克隆和原核表达
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生防萎缩芽孢杆菌CAB-1菌株几丁质酶基因的克隆和原核表达
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-17页
　　· 植物病害的生物防治第10页
　　· 几丁质酶的研究进展第10-13页
　　· 几丁质酶基因的研究及应用第13-14页
　　· 芽孢杆菌菌种的鉴定第14-15页
　　· 外源基因的原核表达第15-16页
　　· 本研究目的及意义第16-17页
2 试验材料第17-21页
　　· 菌株及质粒第17页
　　　　· 菌株第17页
　　　　· 质粒第17页
　　· 培养基第17-18页
　　· 主要试剂和材料仪器第18-21页
　　　　· 化学试剂第18页
　　　　· 试剂盒第18-19页
　　　　· SDS-PAGE 所用试剂第19页
　　　　· 主要仪器第19-21页
3 试验方法第21-32页
　　· 菌株筛选第21页
　　　　· 供试菌株第21页
　　　　· 菌株拮抗活性测定第21页
　　　　· 菌株几丁质酶活性的筛选第21页
　　· 菌株鉴定第21-26页
　　　　· 生理生化鉴定第21-22页
　　　　· 细菌总基因组DNA 的提取第22页
　　　　· 16S rDNA 的克隆第22-23页
　　　　· 大肠杆菌感受态细胞的制备第23-24页
　　　　· 转化大肠杆菌DH5α第24页
　　　　· 阳性重组子的鉴定和测序第24-25页
　　　　· gyrB 的克隆和测序第25页
　　　　· 系统发育分析第25-26页
　　· 几丁质酶基因克隆第26-29页
　　　　· 全序列分析及几丁质酶基因定位第26页
　　　　· 几丁质酶基因的克隆第26页
　　　　· PCR 反应体系及扩增条件第26-27页
　　　　· 质粒提取第27-28页
　　　　· PCR 产物和载体的双酶切第28页
　　　　· 酶切产物纯化第28页
　　　　· 酶切产物的连接第28-29页
　　　　· 转化大肠杆菌及重组质粒的筛选第29页
　　· 生物信息学分析第29页
　　　　· 氨基酸序列分析及信号肽预测第29页
　　　　· 保守结构域分析第29页
　　· 原核表达第29-30页
　　　　· 目的基因转化表达感受态细胞及转化子验证第29页
　　　　· 诱导表达第29-30页
　　· 诱导蛋白的活性研究第30-31页
　　　　· 几丁质酶活性检测第30-31页
　　　　· 抑菌活性检测第31页
　　· 诱导表达条件的优化第31-32页
　　　　· 温度对蛋白表达的影响第31页
　　　　· IPTG 浓度对蛋白表达的影响第31-32页
4 结果与分析第32-41页
　　· 目标生防菌株的筛选第32页
　　· 生防菌株的鉴定第32-34页
　　　　· 生理生化鉴定第32-33页
　　　　· 分子鉴定第33-34页
　　· 几丁质酶基因分析第34-36页
　　　　· 几丁质酶定位和序列比对第34页
　　　　· 几丁质酶基因的生物信息学分析第34-36页
　　· 几丁质酶基因的克隆和原核表达第36-38页
　　　　· 目的基因扩增第36页
　　　　· 表达载体构建第36-37页
　　　　· 蛋白诱导表达第37-38页
　　· 表达蛋白性质分析第38-39页
　　　　· 几丁质酶定性检测第38页
　　　　· 几丁质酶定量检测第38-39页
　　　　· 几丁质酶抑菌活性检测第39页
　　· 几丁质酶chit1 基因异源表达条件优化第39-41页
　　　　· 温度对表达的影响第39-40页
　　　　· IPTG 浓度对表达的影响第40-41页
5 讨论第41-44页
　　· 分泌几丁质酶生防菌株的筛选第41页
　　· 几丁质酶基因的结构及表达产物抑菌活性第41-42页
　　· 目的基因的原核表达第42页
　　· 芽孢杆菌的鉴定第42-44页
6 结论第44-45页
参考文献第45-51页
附录第51-58页
在读期间发表的学术论文第58-59页
作者简历第59-60页
致谢第60-61页

本篇论文共61页，点击这进入下载页面。
 
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