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鸭坦布苏病毒JS2010株的分离鉴定及间接ELISA检测方法的建立

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鸭坦布苏病毒JS2010株的分离鉴定及间接ELISA检测方法的建立
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-10页
图表目录第10-11页
常用中英文缩略词第11-12页
文献综述第12-20页
引言第20-22页
1 材料与方法第22-33页
  · 实验菌株、质粒和血清第22页
  · 酶类与主要试剂(盒)11第22页
  · 实验用SPF鸡胚和细胞系第22页
  · 主要培养基与溶液的配制第22-25页
    · 主要培养基的配制第22-23页
    · 细胞培养所用溶液第23页
    · 感受态细胞制备及转化用溶液第23页
    · SDS-PAGE电泳所需溶液第23-24页
    · 蛋白表达及提纯所用溶液第24-25页
    · Western-blot及ELISA所用溶液第25页
  · 主要仪器第25-26页
  · 鸭坦布苏病毒的分离第26页
    · 病料采集第26页
    · 病毒分离第26页
  · 鸭坦布苏病毒的鉴定第26-27页
    · 血凝性测定第26页
    · PCR鉴定第26-27页
  · 病毒分离株JS2010的培养特性与致病性研究第27-28页
    · 病毒的鸡胚培养第27页
    · 病毒的细胞培养第27-28页
    · 鸡胚半数致死量(ELD50)的测定第28页
    · 病毒半数细胞感染量(TCID50)的测定第28页
    · 病毒感染后组织病理变化检查第28页
  · 病毒分离株JS2010的全基因组测序与分析第28-29页
    · 引物设计第28-29页
    · PCR扩增第29页
    · 全基因组序列的分析第29页
  · 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达与纯化第29-31页
    · E蛋白基因的PCR扩增第29-30页
    · 目的基因与表达质粒的连接第30页
    · 连接产物的转化与鉴定第30页
    · 重组E蛋白的表达与分析第30-31页
    · 重组E蛋白的纯化第31页
    · 重组E蛋白浓度的测定第31页
  · DTMUV的间接ELISA检测方法建立第31-33页
    · 包被抗原和抗体的最佳稀释倍数确定第31页
    · 一抗和酶标二抗最佳孵育时间的确定第31页
    · 间接ELISA判定标准的确定第31-32页
    · 间接ELISA方法的特异性测定第32页
    · 间接ELISA方法的敏感性测定第32页
    · 间接ELISA方法的重复性测定第32页
    · 间接ELISA方法检测临床样品第32-33页
2 结果与分析第33-44页
  · 病毒的分离结果第33页
  · 病毒的鉴定第33-34页
  · 病毒培养特性与致病性第34-36页
    · 培养特性第34-35页
    · 病毒的鸡胚半数致死量(ELD50)24第35页
    · 病毒的细胞半数感染量(TCID50)24第35-36页
    · 组织病理变化第36页
  · DTMUV-JS2010分离株的全基因组测序与分析第36-39页
    · 各基因片段的扩增与序列测定第36-37页
    · 全基因组序列分析第37-39页
  · 重组pET-32a-E质粒的构建与鉴定第39-40页
  · E蛋白的表达与纯化第40-41页
  · 间接ELISA方法的建立第41-44页
    · 包被抗原和抗体的最佳稀释倍数第41页
    · 一抗和酶标抗体的最佳作用时间第41-42页
    · 间接ELISA方法的特异性第42页
    · 间接ELISA方法的敏感性第42页
    · 间接ELISA方法的重复性第42-43页
    · 临床样品的检测结果第43-44页
3 讨论第44-47页
  · 鸭坦布苏病毒的培养特性与致病性第44页
  · 鸭坦布苏病毒的全基因组序列分析第44-45页
  · 重组E蛋白的制备第45页
  · 间接ELISA检测方法的建立及分析第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-52页
附录第52-54页
致谢第54-55页
作者简介第55 页

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