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猪δ冠状病毒的分离、鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立

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猪δ冠状病毒的分离、鉴定及荧光定量PCR检测方法的建立
论文目录
 
摘要第1-9页
Summary第9-11页
缩略语表第11-12页
第一章 文献综述第12-21页
  1.1 冠状病毒简介第12-13页
  1.2 猪δ冠状病毒第13-15页
    1.2.1 猪δ冠状病毒的流行情况第13-14页
    1.2.2 猪δ冠状病毒的传播第14页
    1.2.3 猪δ冠状病毒的病理学研究第14-15页
    1.2.4 猪δ冠状病毒的临床症状第15页
  1.3 猪δ冠状病毒的诊断方法第15-19页
    1.3.1 分离培养鉴定第15-16页
    1.3.2 电子显微镜检测第16页
    1.3.3 免疫组化分析与免疫荧光染色第16页
    1.3.4 病毒中和试验第16-17页
    1.3.5 酶联免疫吸附检测法第17页
    1.3.6 免疫荧光检测法第17-18页
    1.3.7 PCR检测方法第18-19页
  1.4 荧光定量PCR简介第19-20页
  1.5 研究目的与意义第20-21页
第二章 猪δ冠状病毒的分离鉴定第21-42页
  2.1 实验材料第21-22页
    2.1.1 样品及细胞第21页
    2.1.2 主要试剂第21-22页
    2.1.3 主要仪器设备第22页
  2.2 实验方法第22-30页
    2.2.1 样品的采集与处理第22页
    2.2.2 病毒RNA的提取第22-23页
    2.2.3 临床样品的PCR检测第23-24页
    2.2.4 细胞的冻存、复苏与培养第24页
    2.2.5 胰酶对LLC-PK1细胞的毒性测定第24页
    2.2.6 PDCoV病毒的分离培养第24-25页
    2.2.7 分离毒株的鉴定第25-27页
    2.2.8 分离毒株理化性质的测定第27-28页
    2.2.9 分离毒株S基因序列分析第28-30页
  2.3 结果第30-40页
    2.3.1 胰酶对LLC-PK1细胞的毒性测定结果第30-31页
    2.3.2 分离毒株培养结果第31页
    2.3.3 分离毒株鉴定结果第31-33页
    2.3.4 分离毒株理化性质的测定结果第33-36页
    2.3.5 分离毒株S基因测序结果第36-40页
  2.4 讨论第40-41页
  2.5 小结第41-42页
第三章 猪δ冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立第42-56页
  3.1 实验材料第42-43页
    3.1.1 病料样品第42页
    3.1.2 主要试剂第42-43页
    3.1.3 主要仪器及耗材第43页
    3.1.4 引物与探针第43页
  3.2 实验方法第43-46页
    3.2.1 标准阳性质粒的模板的制备第43-44页
    3.2.2 提取与鉴定重组质粒第44-45页
    3.2.3 实时荧光定量PCR参数与体系的优化第45页
    3.2.4 实时荧光定量PCR特异性实验第45页
    3.2.5 实时荧光定量PCR重复性实验第45-46页
    3.2.6 实时荧光定量PCR敏感性实验第46页
    3.2.7 荧光定量标准曲线的建立第46页
    3.2.8 实时荧光定量PCR方法检测临床样品第46页
  3.3 实验结果第46-53页
    3.3.1 制备标准阳性质粒的模板第46-48页
    3.3.2 实时荧光定量PCR参数与体系的优化结果第48-50页
    3.3.3 实时荧光定量PCR特异性实验第50页
    3.3.4 实时荧光定量PCR重复性实验第50-51页
    3.3.5 实时荧光定量PCR敏感性实验第51页
    3.3.6 荧光定量PCR标准曲线的建立第51-53页
    3.3.7 实时荧光定量PCR方法检测临床样品第53页
  3.4 讨论第53-54页
  3.5 小结第54-56页
第四章 全文结论与展望第56-57页
  4.1 结论第56页
  4.2 展望第56-57页
参考文献第57-66页
致谢第66-67页
个人简介第67-68页
导师简介第68-70页

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