论文目录 | |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.1 丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路 | 第11页 |
| 1.2 MAPKs信号通路的激酶组成 | 第11-12页 |
| 1.3 丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）的激活特性 | 第12-13页 |
| 1.4 RAF/MEK/ERK信号通路 | 第13-17页 |
| 1.4.1 ERK1和ERK2（ERK1/2） | 第15页 |
| 1.4.2 MEK1和MEK2 | 第15-16页 |
| 1.4.3 Raf蛋白家族 | 第16-17页 |
| 1.5 JNK信号通路 | 第17-19页 |
| 1.6 P38信号通路 | 第19-20页 |
| 1.7 其他的蛋白激酶 | 第20-22页 |
| 1.7.1 ERK3蛋白及其亚型 | 第20-21页 |
| 1.7.2 ERK5蛋白激酶 | 第21页 |
| 1.7.3 ERK7蛋白激酶 | 第21-22页 |
| 1.7.4 NLK蛋白激酶 | 第22页 |
| 1.7.5 MOK蛋白激酶 | 第22页 |
| 1.8 腺苷酸激酶（Adk） | 第22-25页 |
| 2．材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 前言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第26页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.2 实验试剂及仪器 | 第26页 |
| 2.3 有关试剂的配制 | 第26-31页 |
| 2.3.1 蛋白质表达和纯化相关溶液的配制 | 第26-28页 |
| 2.3.2 蛋白质电泳相关试剂 | 第28-30页 |
| 2.3.3 牛脑裂解液制备相关试剂 | 第30页 |
| 2.3.4 ERK体内体外磷酸化反应及Western bolt所需要的试剂及配制 | 第30-31页 |
| 2.4 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.4.1 重组蛋白的克隆 | 第31-32页 |
| 2.4.2 蛋白质的表达纯化 | 第32-34页 |
| 2.4.3 牛脑细胞细胞质裂解液（S100）的制备 | 第34页 |
| 2.4.4 His-Adk-MEK1R4F激酶活性的检测 | 第34-35页 |
| 2.4.5 Western blot | 第35-37页 |
| 3. 结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第37-38页 |
| 3.2 蛋白质的小量表达及可溶性检测 | 第38-40页 |
| 3.2.1 His-Adk-MEK1R4F重组蛋白的小量表达 | 第38-39页 |
| 3.2.2 His-Adk-MEK1R4F重组蛋白的大量表达及其可溶性检测 | 第39-40页 |
| 3.2.3 His-CBD-TEVs-Adk-MEK1R4F重组蛋白的表达分析 | 第40页 |
| 3.3 重组蛋白质的纯化 | 第40-42页 |
| 3.3.1 MEK1R4F，Adk，ERK2和Adk-MEK1R4F蛋白的纯化 | 第40-42页 |
| 3.3.2 His-Adk-MEK1R4F重组蛋白的纯化 | 第42页 |
| 3.4 His-Adk-MEK1R4F融合蛋白的活性检测 | 第42-47页 |
| 3.4.1 His-Adk-MEK1R4F使用ATP作为能量的活性检测 | 第42-43页 |
| 3.4.2 His-Adk-MEK1R4F使用ADP作为能量的活性检测 | 第43-44页 |
| 3.4.3 Adk-MEK1R4F与MEK1R4F体外磷酸化ERK2的活性比较 | 第44-46页 |
| 3.4.4 Adk-MEK1R4F与MEK1R4F体内磷酸化ERK1/2 的活性比较 | 第46-47页 |
| 3.5 磷酸化ERK2的纯化 | 第47-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 5. 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录一 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 在读硕士期间所发表的论文 | 第63页 |
| 在读硕士期间参加的科研情况 | 第63页 |
