论文目录 | |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-33页 |
| 1.1 马铃薯与钾营养 | 第13-22页 |
| 1.1.1 钾元素的重要性及土壤中钾元素现状 | 第13页 |
| 1.1.2 钾元素对马铃薯的重要性 | 第13-14页 |
| 1.1.3 低钾胁迫下植物钾营养吸收机制 | 第14-19页 |
| 1.1.4 低钾胁迫下植物钾离子通道和转运体的调控 | 第19-22页 |
| 1.2 TOR信号通路 | 第22-29页 |
| 1.2.1 植物中TOR的发现 | 第23-26页 |
| 1.2.2 植物TORC1复合体组份RAPTOR | 第26页 |
| 1.2.3 植物TORC1复合体组份LST8 | 第26页 |
| 1.2.4 植物TORC1复合体的底物 | 第26-28页 |
| 1.2.5 植物TOR信号通路的上游调控元件 | 第28-29页 |
| 1.2.6 TOR以及氮营养调控 | 第29页 |
| 1.3 研究目的及主要研究内容 | 第29-33页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第29-31页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第31-32页 |
| 1.3.3 主要技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 TOR抑制剂导致植物出现缺钾表型 | 第33-39页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 试验材料 | 第33-35页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第33页 |
| 2.2.2 主要试验仪器及试剂 | 第33页 |
| 2.2.3 主要试验试剂及其配方 | 第33-35页 |
| 2.3 试验步骤和方法 | 第35-36页 |
| 2.3.1 TOR抑制剂处理马铃薯茎段 | 第35页 |
| 2.3.2 叶绿素含量测定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 钾消耗试验 | 第36页 |
| 2.4 结果与分析 | 第36-39页 |
| 2.4.1 TOR抑制剂与低钾处理对马铃薯茎段形态建成的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.2 TOR抑制剂处理对马铃薯茎段钾吸收的影响 | 第37-39页 |
| 第三章 CBL1/CBL9-CIPK23-AKT1与TOR信号通路共同调控钾离子吸收 | 第39-43页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 试验材料 | 第39-40页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第39页 |
| 3.2.2 主要试验仪器和试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 主要试验试剂配制 | 第39-40页 |
| 3.3 试验步骤和方法 | 第40页 |
| 3.3.1 拟南芥无菌种子的获得 | 第40页 |
| 3.3.2 生理试验 | 第40页 |
| 3.3.3 钾消耗试验 | 第40页 |
| 3.4 结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.4.1 TOR的二代抑制剂对拟南芥低钾敏感型突变体的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 TOR对CBL1/9-CIPK23-AKT1通路钾离子的吸收的影响 | 第41-43页 |
| 第四章 AtCBL9、AtCIPK23、AtAKT1基因克隆表达及功能分析 | 第43-59页 |
| 4.1 试验材料 | 第43-45页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试验仪器和试剂 | 第43-44页 |
| 4.1.3 主要培养基 | 第44-45页 |
| 4.1.4 大肠杆菌感受态的制备 | 第45页 |
| 4.1.5 农杆菌感受态的制备 | 第45页 |
| 4.2 试验步骤和方法 | 第45-53页 |
| 4.2.1 Trizol法提取植物总RNA | 第45-46页 |
| 4.2.2 逆转录合成c DNA | 第46页 |
| 4.2.3 PCR扩增目的基因 | 第46-47页 |
| 4.2.4 回收目的基因 | 第47-48页 |
| 4.2.5 目的基因的连接和转化 | 第48页 |
| 4.2.6 质粒提取 | 第48-49页 |
| 4.2.7 双酶切反应 | 第49页 |
| 4.2.8 P35S::8GWN连接反应 | 第49-50页 |
| 4.2.9 LR反应 | 第50页 |
| 4.2.10 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第50-51页 |
| 4.2.11 转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第51页 |
| 4.2.12 叶片PCR | 第51页 |
| 4.2.13 转基因拟南芥无菌种子的获得 | 第51页 |
| 4.2.14 三种过表达材料点种试验 | 第51页 |
| 4.2.15 激光共聚焦试验 | 第51-52页 |
| 4.2.16 AtCIPK23-GFP/BP12-2 过表达材料点种试验 | 第52页 |
| 4.2.17 TOR抑制剂对AtCIPK23-GFP/BP12-2 过表达材料的影响 | 第52页 |
| 4.2.18 拟南芥幼苗叶绿素含量测定 | 第52页 |
| 4.2.19 拟南芥幼苗中钾离子含量的测定 | 第52-53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 4.3.1 AtCBL9、AtCIPK23和AtAKT1转基因材料的雷帕霉素敏感性试验 | 第53-54页 |
| 4.3.2 TOR信号通路对AtCIPK23亚细胞定位的影响试验 | 第54-55页 |
| 4.3.3 TOR信号通路通过CIPK23对拟南芥的钾离子积累和生长的影响 | 第55-59页 |
| 第五章 马铃薯中StCIPK23与TOR信号通路的关系 | 第59-65页 |
| 5.1 试验材料 | 第59页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 5.1.2 主要试验仪器和试剂 | 第59页 |
| 5.2 主要培养基的配制 | 第59页 |
| 5.3 试验步骤和方法 | 第59-61页 |
| 5.3.1 马铃薯植株RNA的提取 | 第59页 |
| 5.3.2 逆转录合成c DNA | 第59页 |
| 5.3.3 定量PCR | 第59-60页 |
| 5.3.4 马铃薯StCIPK23-like过表达载体的构建 | 第60页 |
| 5.3.5 农杆菌介导的马铃薯转化 | 第60-61页 |
| 5.3.6 TOR抑制剂处理StCIPK23过表达株系 | 第61页 |
| 5.4 结果与分析 | 第61-65页 |
| 5.4.1 马铃薯中存在CBL1/9-CIPK23-AKT1信号通路组分 | 第61-63页 |
| 5.4.2 TOR信号通路与StCIPK23对马铃薯生长发育的影响 | 第63-65页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第65-69页 |
| 6.1 结论 | 第65-66页 |
| 6.1.1 TOR信号通路与植物钾离子吸收密切相关 | 第65页 |
| 6.1.2 CBL1/CBL9-CIPK23-AKT1与TOR信号通路共同调控钾离子吸收 | 第65页 |
| 6.1.3 TOR信号通路通过AtCIPK23调控植物钾离子吸收 | 第65页 |
| 6.1.4 在马铃薯中存在保守TOR信号通路与CBL1-CIPK23-AKT1信号通路调控马铃薯钾素吸收 | 第65-66页 |
| 6.2 讨论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 发表论文及参加科研一览表 | 第83页 |
