论文目录 | |
| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 胭脂鱼研究概述 | 第13-14页 |
| 1.2 硬骨鱼类免疫系统 | 第14-15页 |
| 1.2.1 免疫器官 | 第14-15页 |
| 1.2.2 免疫细胞 | 第15页 |
| 1.2.3 免疫分子 | 第15页 |
| 1.3 B细胞抗原受体概述 | 第15-18页 |
| 1.3.1 B淋巴细胞受体的组成 | 第15-17页 |
| 1.3.2 B淋巴细胞受体转导途径 | 第17-18页 |
| 1.3.3 B淋巴细胞受体多样性产生的机制 | 第18页 |
| 1.4 CD79在脊椎动物中的研究 | 第18-19页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第19页 |
| 1.6 研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 胭脂鱼CD79a和CD79b基因的克隆及序列分析 | 第21-33页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2.2 实验菌株 | 第21页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.3.2 感受态细胞的制备 | 第23页 |
| 2.3.3 胭脂鱼CD79a核心序列的扩增 | 第23-24页 |
| 2.3.4 RACE扩增 3′和 5′核苷酸序列 | 第24-26页 |
| 2.3.5 cDNA全长的拼接 | 第26页 |
| 2.3.6 生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.4.1 胭脂鱼CD79a和CD79b cDNA全长和生物信息学分析 | 第26-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 胭脂鱼CD79a和CD79b表达模式研究 | 第33-39页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料和仪器 | 第33页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第33页 |
| 3.2.2 实验菌株 | 第33页 |
| 3.2.3 实验试剂及仪器 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.3.1 胭脂鱼CD79发育时期和组织分布检测 | 第33-34页 |
| 3.3.2 嗜水气单孢菌对CD79a和CD79b表达的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 实验结果 | 第35-38页 |
| 3.4.1 胭脂鱼CD79a和CD79b早期发育阶段检测结果 | 第35-36页 |
| 3.4.2 胭脂鱼CD79a和CD79b各组织检测结果 | 第36页 |
| 3.4.3 胭脂鱼CD79a和CD79b Q-PCR检测结果 | 第36-38页 |
| 3.5 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 原位杂交检测CD79a和CD79b阳性信号 | 第39-47页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第39-40页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第39页 |
| 4.2.2 实验试剂及仪器 | 第39页 |
| 4.2.3 有关试剂的配制 | 第39-40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.3.1 探针的制备 | 第40-43页 |
| 4.4 实验结果 | 第43-46页 |
| 4.4.1 原位杂交检测CD79s在系统性免疫器官中的分布情况 | 第43页 |
| 4.4.2 原位杂交检测CD79s在粘膜性免疫器官中的分布情况 | 第43-46页 |
| 4.5 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 胭脂鱼CD79a和CD79b重组蛋白表达与纯化 | 第47-55页 |
| 5.1 引言 | 第47页 |
| 5.2 实验材料 | 第47-48页 |
| 5.2.2 实验菌株和载体 | 第47页 |
| 5.2.3 实验试剂及仪器 | 第47-48页 |
| 5.3 实验方法 | 第48-52页 |
| 5.3.1 含酶切位点目的片段的扩增 | 第48页 |
| 5.3.2 重组载体的构建 | 第48-49页 |
| 5.3.3 重组蛋白的表达与鉴定 | 第49-50页 |
| 5.3.4 Western-blotting分析鉴定目的蛋白 | 第50-51页 |
| 5.3.5 重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 5.4 实验结果 | 第52页 |
| 5.5 讨论 | 第52-55页 |
| 第六章 胭脂鱼CD79a抗体的制备及分析 | 第55-63页 |
| 6.1 引言 | 第55页 |
| 6.2 实验材料和仪器 | 第55-56页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第55页 |
| 6.2.2 实验试剂及仪器 | 第55-56页 |
| 6.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 6.3.1 免疫小鼠 | 第56页 |
| 6.3.2 抗血清效价检测 | 第56页 |
| 6.3.3 胭脂鱼CD79a单克隆抗体的制备 | 第56-59页 |
| 6.3.4 ELISA检测抗体的特异性 | 第59页 |
| 6.3.5 Western-blotting检测抗体的特异性 | 第59页 |
| 6.4 实验结果 | 第59-60页 |
| 6.4.1 间接ELISA抗血清效价检测结果 | 第59页 |
| 6.4.2 杂交瘤细胞筛选结果 | 第59-60页 |
| 6.4.3 Western blot检测结果 | 第60页 |
| 6.5 讨论 | 第60-63页 |
| 全文结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 发表文章 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
