论文目录 | |
摘要 | 第1-5
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Abstract | 第5-11
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1 引言 | 第11-21
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· 猪圆环病毒2 型的国内外研究概况 | 第11-18
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· 病原学 | 第11-12
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· 流行病学 | 第12-13
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· PCV2 致病机制 | 第13-16
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· PCV2 的诊断 | 第16-17
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· PCV2 的防治 | 第17-18
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· 研究内容和技术路线 | 第18-19
页 |
· 研究内容 | 第18-19
页 |
· 技术路线(见下页) | 第19
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· 研究目的与意义 | 第19
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· 研究目标 | 第19-21
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2 材料 | 第21-27
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· 毒株 | 第21
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· 菌株和载体 | 第21
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· 实验动物 | 第21
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· 主要试剂 | 第21-25
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· RNA 和DNA 提取试剂 | 第21-22
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· 细胞培养用溶液 | 第22-23
页 |
· 试剂 | 第23
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· 大肠杆菌感受态细胞制备及转化用溶液 | 第23-24
页 |
· 质粒DNA 提取用溶液 | 第24-25
页 |
· 琼脂糖凝胶电泳用溶液 | 第25
页 |
· 流式细胞术(FCM)检测用标记抗体 | 第25
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· 主要仪器 | 第25-27
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3 方法 | 第27-37
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· PCR 用引物的设计与合成 | 第27-28
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· PAM 抗原递呈功能相关分子、细胞因子和PCV2、PPV 的相关基因片段的重组质粒的构建 | 第28-32
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· 肺泡巨噬细胞的收集 | 第28
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· 肺泡巨噬细胞总RNA 的提取 | 第28-29
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· PCV2 与PPV DNA 的提取 | 第29
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· 共刺激分子和细胞因子及 PCV2、PPV 的部分基因片段重组质粒的构建 | 第29-32
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· 动物实验 | 第32-37
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· 试验动物分组与感染 | 第32
页 |
· PCV2 与PPV 抗体检测 | 第32-33
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· PAM 活性检测 | 第33-34
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· 病毒、细胞因子和CD 分子标准曲线的建立 | 第34
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· PAM 中PCV2、PPV 病毒载量的检测 | 第34-35
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· PAM 细胞因子表达水平的检测 | 第35-36
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· PAM 主要抗原递呈相关分子的检测 | 第36
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· 数据表示和统计分析 | 第36-37
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4 结果与分析 | 第37-76
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· PAM 共刺激分子、细胞因子和PCV2、PPV 目的基因片段重组质粒的鉴定 | 第37-39
页 |
· PAM 共刺激分子、细胞因子和PCV2、PPV 目的基因片段标准曲线的建立 | 第39-45
页 |
· 血清中PCV2 和PPV 抗体检测 | 第45-46
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· PAM 中PCV2 与PPV 的含量 | 第46-48
页 |
· PAM 中PCV2 核酸的含量 | 第46-47
页 |
· PAM 中PPV 核酸的含量 | 第47-48
页 |
· PCV2/PPV 共感染对PAM 存活率与吞噬功能的影响 | 第48-56
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· PCV2/PPV 共感染对PAM 存活率的影响 | 第48-52
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· PCV2/PPV 共感染对PAM 吞噬功能的影响 | 第52-56
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· PCV2/PPV 共感染对PAM 中细胞因子表达水平的影响 | 第56-69
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· 病毒感染猪PAM 表达促炎细胞因子水平的变化 | 第56-60
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· 病毒感染猪PAM 表达趋化细胞因子水平的变化 | 第60-64
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· 病毒感染猪PAM 表达调节细胞因子的水平变化 | 第64-69
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· PAM 抗原递呈相关分子表达水平的变化 | 第69-76
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· PAM 表面SLA-1 和SLA-DR 分子含量的动态变化 | 第69-73
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· PAM 中共刺激分子CD80 mRNA 和CD86 mRNA 的动态变化 | 第73-76
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5 讨论 | 第76-82
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· Real-time FQ-PCR 标准曲线的建立 | 第76-77
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· 管家基因的确定 | 第76
页 |
· 定量方法的确定 | 第76
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· Real-time FQ-PCR 存在的问题 | 第76-77
页 |
· PAM 活性和吞噬功能动态 | 第77-78
页 |
· PAM 表达抗原递呈功能相关分子和细胞因子的动态 | 第78-82
页 |
· PCV2 和PPV 共感染对PAM 促炎细胞因子mRNA 水平的影响 | 第78-79
页 |
· PCV2 和PPV 共感染对PAM 趋化细胞因子mRNA 水平的影响 | 第79
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· PCV2 和PPV 共感染对PAM 调节细胞因子mRNA 水平的影响 | 第79-80
页 |
· PAM 表面SLA-1 和SLA-DR 类分子含量的动态变化 | 第80-81
页 |
· PAM 中共刺激分子CD80 mRNA 和CD86 mRNA 的动态变化 | 第81-82
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6 结论 | 第82-83
页 |
参考文献 | 第83-89
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附录 | 第89-91
页 |
在读期间发表的学术论文与获得的研究成果 | 第91-92
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作者简介 | 第92-93
页 |
致谢 | 第93-94页 |