论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第1章 综述 | 第11-25页 |
| 1.1 丹参研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 丹参的有效活性成分及其药理作用 | 第11-13页 |
| 1.1.2 丹参资源利用现状 | 第13页 |
| 1.2 MYB、bHLH和WD40转录因子研究进展 | 第13-20页 |
| 1.2.1 MYB转录因子 | 第13-15页 |
| 1.2.2 bHLH转录因子 | 第15-17页 |
| 1.2.3 WD40转录因子 | 第17-18页 |
| 1.2.4 MYB-bHLH-WD40(MBW)蛋白复合体的功能 | 第18-20页 |
| 1.3 蛋白质互作研究概述与进展 | 第20-23页 |
| 1.3.1 酵母双杂交技术 | 第20-22页 |
| 1.3.2 双分子荧光互补(BIFC) | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第2章 丹参SmTTG1互作蛋白的酵母双杂交筛选 | 第25-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂与药品 | 第25-27页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第28-34页 |
| 2.2.1 丹参总RNA的提取及cDNA的合成 | 第28页 |
| 2.2.2 丹参SmTTG1基因的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.3 诱饵载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.4 诱饵质粒毒性检测 | 第31-32页 |
| 2.2.5 诱饵质粒自激活检测 | 第32页 |
| 2.2.6 酵母双杂交配对筛选SmTTG1-BD互作的蛋白 | 第32-33页 |
| 2.2.7 筛选文库阳性克隆鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.8 互作蛋白的生物信息学分析 | 第34页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第34-41页 |
| 2.3.1 丹参SmTTG1基因的克隆 | 第34页 |
| 2.3.2 诱饵质粒构建 | 第34-35页 |
| 2.3.3 酵母AH109菌株的检测 | 第35-36页 |
| 2.3.4 诱饵质粒毒性检测 | 第36-37页 |
| 2.3.5 诱饵质粒自激活检测 | 第37-38页 |
| 2.3.6 诱饵质粒筛选丹参cDNA文库互作蛋白 | 第38-39页 |
| 2.3.7 阳性克隆的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.8 候选互作蛋白的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第3章 丹参SmMYB111基因的克隆及表达分析 | 第43-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第43页 |
| 3.1.3 试剂与药品 | 第43页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第43-44页 |
| 3.2 实验方法和步骤 | 第44-45页 |
| 3.2.1 材料处理方法 | 第44页 |
| 3.2.2 丹参总RNA的提取和cDNA的合成 | 第44页 |
| 3.2.3 丹参SmMYB111基因的克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.4 SmMYB111基因生物信息学分析 | 第45页 |
| 3.2.5 SmMYB111基因表达模式分析 | 第45页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第45-51页 |
| 3.3.1 SmMYB111基因的克隆 | 第45-46页 |
| 3.3.2 SmMYB111氨基酸序列比对分析 | 第46-48页 |
| 3.3.3 SmMYB111启动子区的克隆和分析 | 第48页 |
| 3.3.4 SmMYB111基因表达模式分析 | 第48-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-55页 |
| 第4章 丹参MYB、bHLH及WD40蛋白间的互作研究 | 第55-69页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第55-57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第55页 |
| 4.1.3 试剂与药品 | 第55-57页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第57页 |
| 4.2 实验方法和步骤 | 第57-61页 |
| 4.2.1 亚细胞定位表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.2.2 基因枪轰击洋葱表皮细胞介导的基因瞬时表达 | 第58-59页 |
| 4.2.3 酵母双杂交载体构建 | 第59-60页 |
| 4.2.4 酵母感受态制备及重组质粒的共转化 | 第60页 |
| 4.2.5 双分子荧光互补(BIFC)表达载体的构建 | 第60页 |
| 4.2.6 双分子荧光互补(BIFC)验证互作蛋白 | 第60-61页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第61-67页 |
| 4.3.1 亚细胞定位表达载体的构建 | 第61页 |
| 4.3.2 丹参SmTTG1、SmMYC和SnZMYB111基因的亚细胞定位 | 第61页 |
| 4.3.3 酵母双杂交表达载体构建 | 第61-64页 |
| 4.3.4 酵母双杂交检测互作蛋白 | 第64页 |
| 4.3.5 BIFC表达载体构建 | 第64页 |
| 4.3.6 BIFC验证互作蛋白 | 第64-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-69页 |
| 第5章 结论及展望 | 第69-71页 |
| 5.1 结论 | 第69-70页 |
| 5.2 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第83页 |
