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兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达
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兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达
论文目录
摘要
第1-7页
Abstract
第7-13页
第一章 引言
第13-24页
· 研究背景
第13页
· RHDV 研究现状
第13-20页
· RHDV 病原学
第13-14页
· RHDV 分子生物学
第14-16页
· RHD 的流行病学与组织病理学
第16-17页
· RHDV 的检测
第17-18页
· RHD 的防控
第18-20页
· 昆虫-杆状病毒表达系统
第20页
· 家蚕-杆状病毒表达系统
第20-22页
· 家蚕-杆状病毒表达系统的优点
第20-21页
· 家蚕生物反应器表达策略的优化
第21-22页
· 家蚕-杆状病毒表达系统在疫苗生产方面的研究及应用
第22页
· 研究目的和意义
第22-23页
· 实验研究方案
第23-24页
第二章 检测抗体的制备
第24-39页
· 实验材料
第24-25页
· 仪器与试剂
第24页
· 菌株与质粒
第24页
· 引物
第24-25页
· 实验方法
第25-31页
· 实验流程
第25页
· RHDV-vp60 基因序列优化和合成
第25-26页
· 目的片段的扩增
第26页
· PCR 产物的纯化、回收
第26页
· PCR 产物与 pMD18-T 载体的连接
第26页
· E.coli 热击感受态细胞的制备
第26-27页
· 连接产物的转化
第27页
· 鉴定阳性克隆质粒
第27-28页
· 原核表达载体的构建
第28-29页
· 重组蛋白的诱导表达
第29页
· 表达产物存在形式的检测
第29页
· SDS-PAGE 电泳分析
第29页
· 重组蛋白的质谱鉴定
第29页
· 重组蛋白的表达与纯化
第29-30页
· 兔源多克隆抗体制备
第30-31页
· 多克隆抗体效价检测
第31页
· 结果与分析
第31-37页
· vp60 基因序列的优化
第31页
· 目的片段的扩增
第31-32页
· pMD18-T-RHDV-vp60 的酶切验证
第32-33页
· 重组质粒 pET-28a-RHDV-vp60 的验证
第33页
· 重组蛋白表达条件
第33-34页
· 重组蛋白存在形式
第34-35页
· 重组蛋白的纯化
第35页
· 重组蛋白的质谱分析
第35-36页
· 蛋白质浓度测定
第36-37页
· 多克隆抗体效价测定
第37页
· 讨论
第37-39页
第三章 兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达
第39-51页
· 实验材料
第39页
· 仪器与试剂
第39页
· 菌株与质粒、病毒
第39页
· 实验方法
第39-44页
· 实验流程
第39-40页
· 重组杆状病毒转移载体的构建
第40-41页
· 家蚕细胞的准备
第41页
· 病毒 Bm-BacPAK6 基因组 DNA 的制备
第41页
· 基因组 DNA 的线性化
第41页
· 共转染
第41页
· 重组病毒 reBm-RHDV 在蚕体中表达
第41-42页
· RHDV-vp60 基因表达产物的抗原性分析
第42页
· 筛选高表达的克隆毒株
第42页
· RHDV-vp60 基因在家蚕中的表达
第42页
· RHDV 空衣壳的纯化
第42页
· RHDV 空衣壳电镜观察
第42-43页
· RHD 疫苗的制备及免疫
第43页
· 免疫兔血清中抗体的检测
第43页
· 免疫兔病理检测
第43-44页
· 实验结果
第44-50页
· 重组转移载体的鉴定
第44页
· 蚕体中 RHDV 衣壳蛋白基因的表达
第44-45页
· 真核表达蛋白的免疫印迹检测
第45-46页
· 高表达毒株的筛选
第46页
· RHDV 电镜观察
第46-47页
· 兔血清中抗体的检测
第47-48页
· 免疫兔病理检测
第48-50页
· 讨论
第50-51页
第四章 结论
第51-52页
参考文献
第52-58页
附录
第58-63页
致谢
第63-64页
作者简历
第64页
本篇论文共
64
页,
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