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兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达
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兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-24页
　　· 研究背景第13页
　　· RHDV 研究现状第13-20页
　　　　· RHDV 病原学第13-14页
　　　　· RHDV 分子生物学第14-16页
　　　　· RHD 的流行病学与组织病理学第16-17页
　　　　· RHDV 的检测第17-18页
　　　　· RHD 的防控第18-20页
　　· 昆虫-杆状病毒表达系统第20页
　　· 家蚕-杆状病毒表达系统第20-22页
　　　　· 家蚕-杆状病毒表达系统的优点第20-21页
　　　　· 家蚕生物反应器表达策略的优化第21-22页
　　　　· 家蚕-杆状病毒表达系统在疫苗生产方面的研究及应用第22页
　　· 研究目的和意义第22-23页
　　· 实验研究方案第23-24页
第二章 检测抗体的制备第24-39页
　　· 实验材料第24-25页
　　　　· 仪器与试剂第24页
　　　　· 菌株与质粒第24页
　　　　· 引物第24-25页
　　· 实验方法第25-31页
　　　　· 实验流程第25页
　　　　· RHDV-vp60 基因序列优化和合成第25-26页
　　　　· 目的片段的扩增第26页
　　　　· PCR 产物的纯化、回收第26页
　　　　· PCR 产物与 pMD18-T 载体的连接第26页
　　　　· E.coli 热击感受态细胞的制备第26-27页
　　　　· 连接产物的转化第27页
　　　　· 鉴定阳性克隆质粒第27-28页
　　　　· 原核表达载体的构建第28-29页
　　　　· 重组蛋白的诱导表达第29页
　　　　· 表达产物存在形式的检测第29页
　　　　· SDS-PAGE 电泳分析第29页
　　　　· 重组蛋白的质谱鉴定第29页
　　　　· 重组蛋白的表达与纯化第29-30页
　　　　· 兔源多克隆抗体制备第30-31页
　　　　· 多克隆抗体效价检测第31页
　　· 结果与分析第31-37页
　　　　· vp60 基因序列的优化第31页
　　　　· 目的片段的扩增第31-32页
　　　　· pMD18-T-RHDV-vp60 的酶切验证第32-33页
　　　　· 重组质粒 pET-28a-RHDV-vp60 的验证第33页
　　　　· 重组蛋白表达条件第33-34页
　　　　· 重组蛋白存在形式第34-35页
　　　　· 重组蛋白的纯化第35页
　　　　· 重组蛋白的质谱分析第35-36页
　　　　· 蛋白质浓度测定第36-37页
　　　　· 多克隆抗体效价测定第37页
　　· 讨论第37-39页
第三章 兔出血症病毒衣壳蛋白基因在家蚕中的表达第39-51页
　　· 实验材料第39页
　　　　· 仪器与试剂第39页
　　　　· 菌株与质粒、病毒第39页
　　· 实验方法第39-44页
　　　　· 实验流程第39-40页
　　　　· 重组杆状病毒转移载体的构建第40-41页
　　　　· 家蚕细胞的准备第41页
　　　　· 病毒 Bm-BacPAK6 基因组 DNA 的制备第41页
　　　　· 基因组 DNA 的线性化第41页
　　　　· 共转染第41页
　　　　· 重组病毒 reBm-RHDV 在蚕体中表达第41-42页
　　　　· RHDV-vp60 基因表达产物的抗原性分析第42页
　　　　· 筛选高表达的克隆毒株第42页
　　　　· RHDV-vp60 基因在家蚕中的表达第42页
　　　　· RHDV 空衣壳的纯化第42页
　　　　· RHDV 空衣壳电镜观察第42-43页
　　　　· RHD 疫苗的制备及免疫第43页
　　　　· 免疫兔血清中抗体的检测第43页
　　　　· 免疫兔病理检测第43-44页
　　· 实验结果第44-50页
　　　　· 重组转移载体的鉴定第44页
　　　　· 蚕体中 RHDV 衣壳蛋白基因的表达第44-45页
　　　　· 真核表达蛋白的免疫印迹检测第45-46页
　　　　· 高表达毒株的筛选第46页
　　　　· RHDV 电镜观察第46-47页
　　　　· 兔血清中抗体的检测第47-48页
　　　　· 免疫兔病理检测第48-50页
　　· 讨论第50-51页
第四章 结论第51-52页
参考文献第52-58页
附录第58-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

本篇论文共64页，点击这进入下载页面。
 
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