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小反刍兽疫病毒H蛋白在家蚕杆状病毒表面的展示及其免疫原性研究

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小反刍兽疫病毒H蛋白在家蚕杆状病毒表面的展示及其免疫原性研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-12页
缩略语第12-13页
第一章 文献回顾第13-20页
  · 小反刍兽疫病毒及其H 蛋白综述第13-14页
  · 杆状病毒表达系统综述第14-19页
    · 家蚕/ BmNPV 表达系统第14-16页
    · Bac-to-Bac 系统第16-18页
    · 杆状病毒表面展示系统第18-19页
  · 展望第19-20页
第二章 实验方案设计第20-23页
  · 研究目的和意义第20页
  · 研究内容第20-22页
  · 实验流程第22-23页
第三章 生物信息学分析第23-27页
  · 生物信息学工具第23页
  · 方法第23页
  · 结果第23-26页
    · PPRV H 蛋白生物信息学分析结果第23-25页
    · GP64 生物信息学分析结果第25-26页
  · 讨论第26-27页
第四章 pFastBac 1-SHT 重组质粒的构建第27-40页
  · 材料与试剂第27-29页
    · 材料第27页
    · 试剂第27-29页
  · 方法第29-36页
    · pBad/Thio-T0P0-PPRV H 质粒扩增第29-30页
    · 碱裂解法制备小量质粒第30-31页
    · 目的基因的扩增第31-34页
    · PCR 产物和pFastBac 1 载体的双酶切第34页
    · 连接反应第34-35页
    · E. coli TG1 感受态细胞的制备第35页
    · 连接产物的转化第35页
    · 阳性克隆的筛选与鉴定第35-36页
  · 结果第36-39页
    · PPRV H 基因扩增第36页
    · 跨膜序列扩增第36-37页
    · PPRV H 基因与gp64 跨膜序列的PCR 连接与扩增第37页
    · 信号肽-PPRV H-跨膜序列扩增第37-38页
    · pFastBac 1-SHT 重组质粒的鉴定第38-39页
  · 讨论第39-40页
第五章 重组病毒Bacmid-SHT 的获得与鉴定第40-53页
  · 材料与试剂第40-42页
    · 材料第40页
    · 试剂第40-42页
  · 方法第42-49页
    · E. coli DH10Bac 感受态细胞的制备第42页
    · 重组质粒转化E. coli DH10Bac 菌株第42页
    · 挑取单克隆第42页
    · 重组Bacmid 的小量制备第42-43页
    · 重组Bacmid PCR 鉴定第43-45页
    · 细胞复苏第45页
    · 细胞冻存第45页
    · 重组Bacmid-SHT 与脂质体转染BmN 细胞第45-46页
    · 病毒扩增第46页
    · 重组Bacmid-SHT 在Bm N 细胞中的表达分析第46-49页
  · 结果第49-52页
    · E. coli DH10Bac 中重组Bacmid-SHT PCR 鉴定第49-50页
    · 重组Bacmid-SHT 转染细胞第50页
    · 逆转录PCR 结果第50-51页
    · SDS-PAGE 电泳图第51页
    · Western blotting 检测第51-52页
  · 讨论第52-53页
第六章 PPRV H 蛋白在蚕蛹中的表达检测第53-59页
  · 材料与试剂第53页
    · 材料第53页
    · 试剂第53页
    · 试剂的配制第53页
  · 方法第53-56页
    · 重组病毒接种蚕蛹第53-54页
    · 重组病毒基因PCR 鉴定第54-55页
    · 转录水平检测目的基因的表达第55-56页
  · 结果第56-57页
    · 重组Bm NPV-SHT PCR 鉴定第56页
    · 逆转录PCR 结果第56-57页
    · Western blotting 检测第57页
  · 讨论第57-59页
第七章 重组杆状病毒的免疫原性研究第59-66页
  · 试剂与材料第59-60页
  · 方法第60-63页
    · 病毒纯化第60页
    · 免疫小鼠第60-61页
    · 抗体的效价测定第61页
    · 血清中和实验检测重组BmNPV-SHT 免疫原性第61-62页
    · 淋巴细胞增殖实验检测重组BmNPV-SHT 免疫原性第62-63页
  · 结果第63-64页
    · 抗体效价测定第63页
    · 血清中和实验第63页
    · 淋巴细胞增殖实验第63-64页
  · 讨论第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-73页
致谢第73 页

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