论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-8
页 |
| 英文摘要 | 第8-11
页 |
| 第一部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的载体构建 | 第11-32
页 |
| 1 材料 | 第11-15
页 |
| · 菌株和载体 | 第11-13
页 |
| · 试剂 | 第13-14
页 |
| · 试剂配方 | 第14-15
页 |
| 2 方法 | 第15-24
页 |
| · 将pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9质粒转入大肠杆菌DH5a | 第15-17
页 |
| · 引物设计 | 第17
页 |
| · 菌落PCR反应扩增pcr7、pcr9片段 | 第17-18
页 |
| · PCR产物的回收 | 第18
页 |
| · 利用pMD18-T载体克隆pcr7、pcr9基因片段 | 第18-22
页 |
| · 利用pBI121载体克隆pcr7、pcr9片段 | 第22-23
页 |
| · 利用GTK载体克隆pcr7、pcr9片段 | 第23-24
页 |
| 3 结果与分析 | 第24-30
页 |
| · 菌落PCR反应检测pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9大肠杆菌转化子 | 第24-25
页 |
| · pMD18-T载体的构建以及酶切检测 | 第25-26
页 |
| · 真核表达载体的构建以及双酶切检测 | 第26-29
页 |
| · 原核表达载体构建以及双酶切检测 | 第29-30
页 |
| 4 讨论 | 第30-32
页 |
| 第二部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9基因转入拟南芥中的研究 | 第32-42
页 |
| 1 材料 | 第32-33
页 |
| · 实验材料 | 第32
页 |
| · 菌株和载体 | 第32
页 |
| · 试剂配方 | 第32-33
页 |
| 2 方法 | 第33-35
页 |
| · 农杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第33-34
页 |
| · 转化农杆菌 | 第34
页 |
| · 重组质粒的鉴定 | 第34
页 |
| · 花序浸染法转化拟南芥 | 第34-35
页 |
| · 转基因种子筛选 | 第35
页 |
| 2.6.转基因植株PCR检测 | 第35
页 |
| · 转基因植株生理性状统计 | 第35
页 |
| 3 结果与分析 | 第35-39
页 |
| · 农杆菌转化检测 | 第36
页 |
| · 转基因植株的筛选 | 第36-37
页 |
| · 转基因植株PCR检测 | 第37
页 |
| · 转基因植株的生理性状分析 | 第37-39
页 |
| 4 讨论 | 第39-42
页 |
| · 转基因植株构建 | 第39-40
页 |
| · 生理性状数据分析 | 第40-42
页 |
| 第三部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的原核表达与分离纯化 | 第42-50
页 |
| 1 材料 | 第42-43
页 |
| · 载体 | 第42
页 |
| · 试剂配方 | 第42-43
页 |
| 2 方法 | 第43-45
页 |
| · GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的诱导表达 | 第43-44
页 |
| · Western-blot检测 | 第44-45
页 |
| · GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的纯化 | 第45
页 |
| 3 结果与分析 | 第45-48
页 |
| · GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第45-47
页 |
| · GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的Western-Blot分析 | 第47
页 |
| · 融合蛋白的初步纯化 | 第47-48
页 |
| 4 讨论 | 第48-50
页 |
| 文献综述 | 第50-68
页 |
| 参考文献 | 第68-78
页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第78-79
页 |
| 致谢 | 第79-80
页 |
