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间接ELISA检测猪传染性胃肠炎与猪呼吸道冠状病毒抗体的方法建立

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间接ELISA检测猪传染性胃肠炎与猪呼吸道冠状病毒抗体的方法建立
论文目录
 
中文摘要第1-6 页
Abstract第6-8 页
符号说明第8-11 页
前言第11-25 页
  1 猪传染性胃肠炎和猪呼吸道冠状病毒概述第11-13 页
  2 猪传染性胃肠炎病毒分子生物学研究进展第13-19 页
  3 猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒的鉴别诊断第19-24 页
  4 本实验的目的和意义第24-25 页
1.材料第25-27 页
  · 病毒和细胞第25 页
  · 质粒与菌株第25 页
  · 血清第25 页
  · 主要试剂第25 页
  · 主要仪器设备第25-27 页
2.方法第27-35 页
  · 表达菌株pET32a-SBC和pET32a-N的复苏与鉴定第27-28 页
    · 重组质粒pET32a-SBC的复苏与鉴定第27-28 页
    · 重组质粒pET32a-N的复苏与鉴定第28 页
  · 重组pET32a-SBC和pET32a-N的表达第28-30 页
    · 原核表达质粒在大肠杆菌中的表达及表达产物的SDS-PAGE第29 页
    · 重组蛋白活性分析第29-30 页
    · 重组SBC和N蛋白的纯化及含量测定第30 页
  · 间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体的方法建立与优化第30-33 页
    · 间接ELISA方法的操作程序及判定标准第31 页
    · 间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体的反应条件优化第31-33 页
    · 间接ELISA特异性试验第33 页
    · 间接ELISA重复性试验第33 页
  · 临床猪血清检测第33 页
  · 血清中和试验第33-35 页
3. 结果第35-52 页
  · 重组pET32a-SBC的PCR和双酶切鉴定第35 页
  · 重组pET32a-N的PCR和双酶切鉴定第35-36 页
  · 重组质粒pET32a-SBC和pET32a-N表达结果第36-38 页
    · 重组SBC和N蛋白的SDS-PAGE结果第36-37 页
    · 重组蛋白Western-blotting鉴定第37-38 页
  · 间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体方法的最佳反应条件第38-47 页
    · 以重组SBC蛋白为抗原的ELISA最佳反应条件的确定第38-42 页
    · 以重组N蛋白为抗原的ELISA最佳反应条件的确定第42-46 页
    · SBC蛋白包被孔阴阳性临界值的确定第46 页
    · N蛋白包被孔阴阳性临界值的确定第46-47 页
  · 间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体方法的特异性试验第47-48 页
  · 间接ELISA重复性试验第48-49 页
  · 临床猪血清检测第49-50 页
  · ELISA临床检测与血清中和试验对照比较第50-52 页
    · SBC蛋白包被孔实验结果与血清中和试验对照比较第50-51 页
    · N蛋白包被孔实验结果与血清中和试验对照比较第51-52 页
4.讨论第52-55 页
  · 蛋白质纯化第52 页
  · 选择TGEV SBC和N的原因第52-53 页
  · 表达载体的选择第53 页
  · ELISA反应的最佳条件第53-54 页
  · ELISA诊断和血清中和试验临床检测的对比第54 页
  · ELISA试验临床检测结果第54-55 页
5.结论第55-56 页
参考文献第56-64 页
致谢第64-65 页
附录第65 页

本篇论文共65页,点击这进入下载页面
 
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