论文目录 | |
| 本论文的创新性工作 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 第一部分 文献综述及选题目的和意义 | 第14-20页 |
| 第一章 疱疹病毒gI基因及其编码蛋白的研究进展 | 第14-20页 |
| 1. 疱疹病毒gI基因及其编码蛋白的研究进展 | 第14-19页 |
| · 疱疹病毒概述 | 第14页 |
| · 疱疹病毒gI基因的特点 | 第14页 |
| · 疱疹病毒gI基因编码蛋白的特点 | 第14-15页 |
| · 疱疹病毒gI蛋白的亚细胞定位 | 第15页 |
| · 疱疹病毒gI蛋白的功能 | 第15-18页 |
| · 疱疹病毒gI蛋白与其他蛋白的相互作用 | 第18-19页 |
| · 展望 | 第19页 |
| 2. 选题的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 实验研究 | 第20-69页 |
| 第二章 鸭瘟病毒gI基因生物信息学分析 | 第20-34页 |
| 1. 材料与方法 | 第20-21页 |
| · 材料 | 第20页 |
| · 方法 | 第20-21页 |
| 2. 结果 | 第21-31页 |
| · 鸭瘟病毒gI基因核酸特征分析 | 第21页 |
| · 鸭瘟病毒gI基因编码蛋白特征分析 | 第21-29页 |
| · 鸭瘟病毒gI基因密码子偏爱性分析 | 第29-31页 |
| 3. 讨论 | 第31-34页 |
| · 关于生物信息学 | 第31页 |
| · 鸭瘟病毒gI基因及其编码蛋白特征分析 | 第31-32页 |
| · 鸭瘟病毒gI基因密码子偏爱性对表达的影响 | 第32-34页 |
| 第三章 鸭瘟病毒gI基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第34-52页 |
| 1. 材料 | 第34-35页 |
| · 毒株、菌株及载体 | 第34页 |
| · 实验动物 | 第34页 |
| · 主要试剂 | 第34页 |
| · 主要溶液及配制 | 第34-35页 |
| · 主要仪器设备 | 第35页 |
| 2. 方法 | 第35-43页 |
| · DPV基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| · PCR扩增 | 第36-37页 |
| · T-克隆与鉴定 | 第37-38页 |
| · DPVgI基因表达载体的构建 | 第38-40页 |
| · DPVgI重组蛋白的表达及条件优化 | 第40-41页 |
| · DPVgI重组蛋白的纯化 | 第41页 |
| · Western-blot鉴定DPVgI重组蛋白 | 第41-42页 |
| · 兔抗DPV 6×His-gI多克隆抗体的制备 | 第42页 |
| · 琼脂扩散试验检测兔抗6×His-gI抗体效价 | 第42-43页 |
| · 兔抗DPV gI重组蛋白IgG的纯化及鉴定 | 第43页 |
| 3. 结果 | 第43-50页 |
| · DPVgI基因的扩增和T-克隆鉴定 | 第43-44页 |
| · 重组表达质粒pET-32a(+)-gI的鉴定 | 第44页 |
| · DPVgI重组蛋白的表达及条件优化 | 第44-47页 |
| · 兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第47页 |
| · 兔抗DPV6×His-gI重组蛋白血清效价的琼脂扩散试验检测 | 第47-48页 |
| · Western-blot检测兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白血清特异性 | 第48-49页 |
| · 兔抗DPV 6×His-gI重组蛋白IgG的纯化及鉴定 | 第49-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-52页 |
| · 外源基因的融合表达 | 第50-51页 |
| · 多克隆抗体的制备及纯化 | 第51-52页 |
| 第四章 鸭瘟病毒体外感染宿主细胞gI基因转录时相分析 | 第52-64页 |
| 1. 材料 | 第52-53页 |
| · 毒株/细胞 | 第52页 |
| · 主要试剂 | 第52页 |
| · 主要仪器设备 | 第52页 |
| · 其他 | 第52-53页 |
| 2. 方法 | 第53-55页 |
| · FQ-PCR检测DPV感染宿主细胞后gI基因的转录 | 第53-55页 |
| · 核酸蛋白合成抑制试验分析gI基因类型 | 第55页 |
| 3. 结果 | 第55-62页 |
| · RNA质量检测 | 第55-56页 |
| · 引物特异性检测 | 第56页 |
| · FQ-PCR标准曲线的绘制 | 第56-59页 |
| · DPV体外感染DEF后gI基因转录情况 | 第59-61页 |
| · 核酸蛋白合成抑制后体外感染DEF的DPV gI基因转录情况 | 第61-62页 |
| 4. 讨论 | 第62-64页 |
| · 荧光定量PCR法检测DPV gI基因转录情况 | 第62-63页 |
| · 核酸蛋白合成抑制试验分析gI基因类型 | 第63-64页 |
| 第五章 鸭瘟病毒体外感染宿主细胞gI基因的表达与定位 | 第64-69页 |
| 1. 材料 | 第64页 |
| · 毒株/细胞 | 第64页 |
| · 主要试剂 | 第64页 |
| · 主要仪器设备 | 第64页 |
| 2. 方法 | 第64-65页 |
| · 间接免疫荧光检测DPV gI蛋白在细胞中定位方法的建立 | 第64页 |
| · 间接免疫荧光检测DPV gI蛋白在细胞中定位方法的优化 | 第64-65页 |
| · 结果判定标准 | 第65页 |
| · DPV gI蛋白细胞定位的动态监测 | 第65页 |
| 3. 结果 | 第65-67页 |
| · 间接免疫荧光检测DPV gI蛋白细胞定位方法的建立及优化 | 第65页 |
| · DPV gI蛋白细胞定位的动态监测 | 第65-67页 |
| 4. 讨论 | 第67-69页 |
| 第三部分 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76
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