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血管瘤型J亚群禽白血病病毒全基因组核酸序列分析及gp85基因的原核表达

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血管瘤型J亚群禽白血病病毒全基因组核酸序列分析及gp85基因的原核表达
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-8页
英文缩略表第8-10页
目录第10-12页
第一部分 前言第12-22页
  1 病原学第13-17页
    · 生物学分类地位第13页
    · 病毒粒子结构第13页
    · 基因组结构第13-15页
    · 病毒稳定性第15页
    · 病毒的培养特性第15页
    · 病毒的致病性第15-16页
    · 病毒致肿瘤机制第16-17页
  2 ALV-J流行病学第17-18页
  3 ALV-J临床症状第18页
  4 ALV-J的鉴别和诊断第18-20页
    · ALV-J的分离与鉴定第18-19页
    · ALV-J单克隆抗体的应用第19页
    · ALV-J的PCR检测第19-20页
  5 ALV-J的防治第20-21页
  6 研究的目的和意义第21-22页
第二部分 试验研究第22-56页
  第一章 血管瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCDY1全基因组核酸序列分析第22-43页
    1 材料第22-25页
      · 病料与细胞第22页
      · 菌株与载体第22-23页
      · 试验试剂第23-24页
        · 主要试剂第23页
        · 常用试剂的配制第23-24页
      · 主要试验仪器第24-25页
      · 引物的设计第25页
    2 试验方法第25-31页
      · 病毒的分离与鉴定第25-27页
        · 病毒的分离第25-26页
        · 病毒的鉴定第26-27页
      · SCDY1全基因组核酸序列的测定第27-30页
        · SCDY1全基因组核酸序列的PCR扩增第27页
        · SCDY1 cDNA末端序列的扩增第27-28页
        · 胶回收第28页
        · 各段基因的TA克隆第28页
        · 重组质粒的转化第28-29页
        · 重组质粒的筛选和鉴定第29-30页
      · SCDY1分离株全基因组的遗传变异分析第30-31页
    3 试验结果第31-40页
      · 病毒分离与鉴定第31-32页
        · PCR扩增结果第31页
        · RT-PCR扩增结果第31-32页
      · SCDY1全基因纰核酸序列测定结果第32-36页
        · 全基因PCR扩增结果第32-33页
        · 全基因各段基因双酶切鉴定结果第33-34页
        · SCDY1毒株全基因组核苷酸序列的建立第34-36页
      · SCDY1前病毒cDNA全基因组序列与已知ALV-J毒株相应序列的同源性比较第36-40页
        · 结构基因gag、pol和env的比较第36页
        · LTR区段的比较第36-37页
        · 3’UTR分析第37-38页
        · U3区潜在转录因子结合位点分析第38-39页
        · 前病毒cDNA全序列遗传进化分析第39-40页
    4 讨论第40-42页
    5 小结第42-43页
  第二章 血管瘤型J亚群禽白血病病毒SCDY1株gp85基因的原核表达第43-56页
    1 材料第43-45页
      · 毒株、菌株及载体第43页
      · 主要试剂第43-44页
      · 试验仪器第44页
      · 试剂配制第44-45页
        · 基因表达相关试剂第44-45页
        · 蛋白纯化及鉴定相关试剂第45页
    2 方法第45-49页
      · gp85基因的生物信息学分析第45页
      · 引物的设计第45-46页
      · 原核表达载体的构建第46页
        · 重组质粒的抽提与Rosetta(DE3)感受态细胞的制备第46页
        · 带粘性末端的gp85基因与pET-32a(+)载体的酶切第46页
        · 连接、转化及鉴定第46页
      · pET-32-gp85的表达第46-48页
        · 重组质粒pET-32-gp85的表达第46-47页
        · SDS-PAGE鉴定第47页
        · 表达条件的筛选优化第47-48页
        · 表达产物的初步纯化第48页
      · Western-blot分析第48-49页
    3 结果第49-53页
      · gp85基因的生物信息学分析第49-50页
      · gp85蛋白表达载体的构建第50-51页
      · pET-32-gp85的表达第51-52页
        · 表达条件的优化第51-52页
        · 重组表达蛋白初步纯化结果第52页
      · 表达蛋白Westem-blot分析第52-53页
    4 讨论第53-54页
    5 小结第54页
    6 结论第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表的学术论文第62 页

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