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线虫fat-1基因在家兔胎儿成纤维细胞中的表达

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线虫fat-1基因在家兔胎儿成纤维细胞中的表达
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 文献综述第9-17页
  · 研究背景第9-10页
  · fat-1基因概述第10-11页
  · ω-3脂肪酸脱氢酶的生物学作用第11-15页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶对抗心血管疾病方面的作用第11-12页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶在神经系统方面的作用第12页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶在抗癌方面的作用第12-14页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶在体内的代谢第14页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶在生物膜中的作用第14-15页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶的调控功能第15页
  · 脂肪酸脱氢酶的代谢途径及特点第15-16页
  · 选题目的意义第16-17页
2 材料与方法第17-38页
  · 实验材料第17-23页
    · 实验材料的采集第17页
    · 实验主要仪器设备第17-18页
    · 载体选择第18页
    · 菌株选择第18页
    · 实验试剂及其厂家第18-20页
    · 试剂配制第20-23页
  · 家兔成纤维细胞的培养第23页
  · 线虫的培养第23-24页
    · 虫体的培养第23-24页
    · 虫体形态的观察第24页
    · 虫体的保存第24页
  · 线虫总RNA提取第24-25页
    · 线虫总RNA提取第24-25页
    · 线虫总RNA检测第25页
  · 反转录cDNA第25-26页
    · 反应体系第25-26页
    · 反应条件第26页
  · 目的基因的PCR扩增第26-28页
    · PCR扩增第26-27页
    · PCR产物的检测第27-28页
  · 克隆PCR反应产物第28-31页
    · 回收与纯化PCR产物第28-29页
    · fat-1与T载体连接第29页
    · 大肠杆菌感受态制备,采用CaCl_2法制备感受态细胞第29-30页
    · E.coli的热激转化第30页
    · 亚克隆第30-31页
    · 菌液PCR鉴定及保存第31页
  · 重组表达载体的构建和测定第31-33页
    · 抽提质粒第31-32页
    · fat-1基因的双酶切第32-33页
    · 重组载体的构建第33页
    · 重组质粒的提取第33页
  · 转染、筛选及蛋白质的提取第33-34页
    · 转染第33-34页
    · 筛选转染成功的细胞第34页
  · 线虫fat-1基因的表达第34-38页
    · 重组蛋白质的分离提取第34-35页
    · 重组蛋白的检测第35-38页
3 结果与分析第38-50页
  · 家兔成纤维细胞的培养第38-39页
  · 线虫fat-1基因CDS区克隆第39-40页
    · 线虫fat-1基因的PCR扩增效果图第39页
    · 线虫fat-1基因的亚克隆菌液PCR鉴定第39-40页
  · 线虫fat-1基因的生物信息学分析第40-46页
    · 线虫fat-1基因CDS区核苷酸和氨基酸序列分析第40-42页
    · 线虫fat-1基因及其编码氨基酸的同源性分析第42页
    · ω-3脂肪酸脱氢酶疏水性分析第42-43页
    · 线虫ω-3脂肪酸脱氢酶信号肽的分析第43页
    · 线虫ω-3脂肪酸脱氢酶跨膜区的分析第43-44页
    · 二级结构预测第44-46页
  · 重组表达质粒的构建第46-48页
    · 构建pfat1-GFP重组表达质粒第46-47页
    · 重组表达载体的检测第47-48页
  · fat-1基因的真核表达第48-50页
    · fat-1基因的转染第48-49页
    · fat-1蛋白的SDS-PAGE检测及Western Blotting分析第49-50页
4 讨论第50-55页
  · 线虫培养第50页
  · 家兔成纤维细胞的培养第50页
  · 真核表达载体的选择第50-52页
  · 蛋白的表达第52页
  · 酶切过程的星号活性问题第52-53页
  · 实验过程中遇到的问题及解决方法第53-55页
5 结论第55-57页
6 参考文献第57-61页
致谢第61 页

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