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抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体的制备与鉴定药学 |
| [生化制药论文]
作者：王婉，高媛，杨金菊，柳晓兰，鞠艳芳，刘莉，陈志成 刘蓉，
迟俊，邢维贤，高建恩，安立国，孙启鸿
【摘要】 本 研究 制备抗人尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2（UDPglucose pyrophosphorylase 2）的单克隆抗体（mAb）并进行初步鉴定。将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白，用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠，采用杂交瘤技术制备单克隆抗体，通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的 方法 对单克隆抗体进行特性鉴定，通过UniZAP XR肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗体特异性。结果表明：通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人UGP2 mAb 的杂交瘤细胞系BAD062，其分泌的单克隆抗体的Ig亚类(型)为IgG2b (κ)，Western blot 结果显示该抗体可以特异地识别分子量为56 kD的蛋白； 应用 单克隆抗体BAD062对人肝脏cDNA表达文库（UniZAP XR）进行筛选，阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为UGP2。结论：单克隆抗体BAD062特异地识别抗原UGP2，该抗体可用于ELISA检测、Western blot、免疫组织化学实验，为UGP2的研究提供了有力的工具。
【关键词】 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2 单克隆抗体 cDNA表达文库
Preparation and Identification of Monoclonal Antibody Against
Abstract The study was aimed to generate monoclonal antibodies (mAbs) against homo sapiens UDPglucose pyrophosphorylase 2 (UGP2). Normal human liver tissues homogenized, and cytosolic proteins isolated by centrifugation were used to immunize BALB/c mice to generate mAbs by hybridoma technique……
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| 投稿人：7uy |
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最后编辑：fibg |
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