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人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和
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人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性药学

[生化制药论文]         作者:原野,张云生,李秀森,郭子宽,刘晓丹,侯春梅,唐佩弦,毛宁 【摘要】  人干细胞生长因子(human stem cell growth factor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependent carbohydrate recognition domain,CRD)内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ。hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性。本 研究 目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖。为克服hSCGF的cDNA GC含量较高的困难,本研究以两步PCR的 方法 从人胎肝cDNA文库(Clontech)中成功克隆hSCGF cDNA,进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中,融合表达。研究结果表明,通过低温诱导(28℃),重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用亲和层析纯化融合表达蛋白。对重组蛋白的造血刺激活性 分析 表明,不同于截短型分子hSCGFβ,全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖。结论: hSCGF CRD不直接结合受体,可能具有其他生物学功能。 【关键词】  cDNA克隆   Cloning,Expression and Purification of Human Stem Cell Growth Factor cDNA  and  Its Species-specificity in Hematopoiesis   Abstract   Stem cell growth factor (SCGF) is an early-acting hematopoitic cytokine that has two isoforms including hSCGF with full length molecules and   hSCGFβ,78 amino acids of which lost in the conserved calcium-dependent carbohydrate-recognition domain (CRD).It has been demonstrated that hSCGFβ is strictly species-specific in regulating he-matopoiesis.This study was  aimed to explore whether human SCGF can exert synergistic stimulatory eff……
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投稿人:7uy     最后编辑:fibg
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