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人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性药学 |
| [生化制药论文]
作者：原野，张云生，李秀森，郭子宽，刘晓丹，侯春梅，唐佩弦，毛宁
【摘要】 人干细胞生长因子（human stem cell growth factor，hSCGF）是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式，包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域（calcium-dependent carbohydrate recognition domain，CRD）内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ。hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性。本 研究 目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖。为克服hSCGF的cDNA GC含量较高的困难，本研究以两步PCR的 方法 从人胎肝cDNA文库（Clontech）中成功克隆hSCGF cDNA，进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中，融合表达。研究结果表明，通过低温诱导（28℃），重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中，利用亲和层析纯化融合表达蛋白。对重组蛋白的造血刺激活性 分析 表明，不同于截短型分子hSCGFβ，全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖。结论： hSCGF CRD不直接结合受体，可能具有其他生物学功能。
【关键词】 cDNA克隆
Cloning，Expression and Purification of Human Stem Cell Growth Factor cDNA and Its Species-specificity in Hematopoiesis
Abstract Stem cell growth factor (SCGF) is an early-acting hematopoitic cytokine that has two isoforms including hSCGF with full length molecules and hSCGFβ，78 amino acids of which lost in the conserved calcium-dependent carbohydrate-recognition domain (CRD).It has been demonstrated that hSCGFβ is strictly species-specific in regulating he-matopoiesis.This study was aimed to explore whether human SCGF can exert synergistic stimulatory eff……
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| 投稿人：7uy |
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最后编辑：fibg |
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