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siRNA靶向Her2逆转录病毒载体构建
RNA干扰Nucleostemin基因对人食管癌
PTEN、MMP7、VEGF在骨巨细胞瘤中
p16INK4A和bcl2蛋白在CIN和宫颈鳞
OPCML对卵巢癌细胞抑制的体内外实验
NKG2D介导NK细胞对鼻咽癌细胞杀伤作
DNAPKcs表达与鼻咽癌细胞株放射敏
BMP2、OPN、VEGF的表达在骨肉瘤肺
黄芪增免散对围手术期食管癌组织La
环孢素A对阿霉素治疗肝癌影响的实
抗肝癌hdsFv融合RCRNase重组免疫
谷胱甘肽S转移酶A1在肝癌中的异常
牛黄天龙胶囊(含药血清)诱导人子
尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL
多西紫杉醇诱导人乳腺癌MCF7细胞
大肠腺癌组织中VASP和PCNA的表达药
脆性组氨酸三聚体基因在舌鳞状细胞
维生素E琥珀酸酯对MCF7乳腺癌细胞
吉西他滨对人非小细胞肺癌A549细胞
环氧化酶2与肿瘤的关系药学
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siRNA靶向Her2逆转录病毒载体构建及其在SKOV3中的表达药学

[生化制药论文]           作者:周颖,凌斌,高婷,陈敏,冯定庆,程志祥,朱园园,赵卫东,石永云,王梅梅,祝怀平 【摘要】  目的 构建并鉴定Her2特异性siRNA逆转录病毒载体,将其导入SKOV3卵巢癌细胞中,并初步筛选有效抑制Her2表达的细胞株。 方法 体外合成含针对Her2特异基因序列的寡核苷酸并定向克隆入逆转录病毒载体RNAiReady pSIRENRetroQ,构建的载体通过测序、酶切鉴定后,脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,嘌呤霉素筛选并挑选细胞克隆,收获病毒上清,将病毒上清转染SKOV3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2表达的SKOV3细胞株,并分别通过RTPCR和免疫组化方法鉴定抑制Her2表达的效果。结果 成功构建了重组逆转录病毒载体,转染包装病毒细胞株获得的病毒上清成功转染了SKOV3, 并且抑制了Her2的表达。结论 抑制Her2表达的SKOV3细胞株的建立,为观察转染siRNA的逆转录病毒表达载体的肿瘤细胞恶性生物学行为变化奠定了实验基础。 【关键词】  Her2;RNA干扰;逆转录病毒载体    Abstract:Objective  To establish the stable SKOV3 cell lines with a persistent knockdown of Her2 by transfecting the recombinant retroviral vectors of siRNA specific for Her2 into SKOV3 cell line. Methods  We synthesized oligonucleotides for Her2 in vitro, and cloned them into retroviral vector RNAiReady pSIRENRetroQ. Subsequently the plasmids were sequenced and digested to identify the successful construction of the recombinant retroviral vectors. The vectorsbased RNAi were transfected into packing cell line PT67, which was selected by puromycin later. SKOV3 was infected by the virus supernatant of stable PT67 cell lines, and the stable SKOV3……
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投稿人:7uy     最后编辑:fibg
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