【摘要】 目的通过对复方大果木姜子软膏Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号3个制剂处方水提、醇提物体外抗HSV1病毒作用的研究,优选出一个最佳组方提取工艺,为进一步将其开发成一种安全有效的治疗单纯性疱疹病毒的中药新药提供依据。方法通过细胞培养法,采用观察细胞病变(CPE)和噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察复方大果木姜子软膏提取物抗HSVⅠ病毒感染的作用;以治疗指数(TI)为评价指标,比较各处方的抗病毒活性强弱。结果复方大果木姜子软膏Ⅰ号,Ⅱ号,Ⅲ号三个处方其水煎液及醇提液都有不同程度的体外抑制HSV1在Hep2细胞中增殖的作用;其中Ⅱ号处方的水提取物作用最强。结论 选用复方大果木姜子软膏Ⅱ号处方采用水煎提取作为制剂研究的最优处方工艺。
【关键词】 复方大果木姜子软膏; 细胞培养实验方法; 抗病毒活性; 处方筛选
大果木姜子Cinnamomum migao H. W. Li系樟科樟属植物米槁的干燥果实,是贵州十大苗药之一。现有的研究表明,大果木姜子具有增加血循环、改善心肌缺血、抗流感病毒[1~4] 等作用。通过前期的实验研究已证明了大果木姜子精油具有良好的体外抗病毒作用(大果木姜子精油体外抗HSV1病毒实验研究待发表),为将其更好地开发为一种治疗单纯性疱疹病毒的复方药物,本研究采用细胞培养技术对大果木姜子精油与其它药物组成的Ⅰ号,Ⅱ号,Ⅲ号3个处方,进行抗HSV1病毒活性研究,现将实验结果报道如下。
1 材料与仪器
1.1 试剂材料
RPMI1640培养(GIBCO公司);胰酶(GIBCO公司);新生牛血清(杭州四季青生物制剂公司);平衡盐液:Hanks液;噻唑盐(MTT,北京天港邦定生物医学科技有限公司),其它试剂均为分析纯。
MTT溶液:称取50 mgMTT,放入小烧杯中,加入50 ml维持液,过0.22 μm的微孔滤膜过滤……
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