[高血压医学论文] 【摘要】 目的:观察不同剂量硫酸铍(BeSO4)在不同时相处理后引发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤的剂量效应. 方法:采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)分别测定BALB/c小鼠脾淋巴细胞体外染毒0.2, 2, 20, 100和200 μmol/L 1 h和2 h后DNA链断裂损伤情况. 结果:在不同剂量硫酸铍染毒1 h后,脾淋巴细胞出现DNA链断裂损伤的测定指标在各剂量组明显高于对照;染毒1 h 和2 h后,细胞均出现明显的DNA链断裂损伤,但其相同剂量组之间差异无显著性. 结论:硫酸铍可诱发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤.
【关键词】 硫酸铍
0引言
铍(Beryllium)及其化合物具有众多优良的理化性质,被广泛应用于高科技工业领域. 国际癌症研究中心(IARC)最新公布的对人致癌性总评价表中已将铍及其化合物列为人类肯定致癌物[1]. 已知铍及其化合物可损害机体的免疫系统[2-4]. 因此,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)法检测,以判断硫酸铍导致脾淋巴细胞功能异常是否由于DNA 断裂损伤所致,对于探讨铍免疫毒性作用机制具有重要意义.
1材料和方法
1.1材料BALB/c小鼠, 雄性, 体质量(20±2) g, 6~8 wk龄,二级动物,宁夏医学院实验动物中心提供. 硫酸铍(BeSO4·4H2O, SigmaAldrich公司); 胎牛血清(Hyclone公司); RPMI 1640 (Gibco公司); 低熔点琼脂糖(Sigma公司); 正常熔点琼脂糖(Sigma公司); 肌氨酸钠(Promega公司); Tris Base (NOVEN公司); 碘化丙锭(PI, Sigma公司); 二甲基亚砜(DMSO, 北京化工厂); TritonX100 (Sigma公司); 甲醛(北京化工厂); EDTA(天津化学试剂厂); 全磨沙载玻片;恒温水浴箱(北京医疗设备厂); 荧光显微镜(CK X41, Olympus); 稳压稳流电泳仪(BIORAD; 水平式凝胶电泳槽(DYYⅢ 33A型, 北京六一仪器厂).
1.2方法
1.2.1脾淋巴细胞悬液的制备常规无菌取脾,用注射器内芯加Hanks (pH 7.4, 4℃) 研磨,200目筛网过滤,用RPMI 1640完全培养液将其稀释成1×108个……
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